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98891-36-2,L-Homopropargylglycine的反应条件
发布时间:2025-06-11     作者:axc   分享到:

98891-36-2,L-Homopropargylglycine的反应条件

L-Homopropargylglycine(简称HPG)是一种人工合成的非氨基酸,其结构为L-α-氨基丙炔酸,主链与甘氨酸类似,但在侧链末端引入一个炔基(–C≡CH),使其具备化学“点击”反应能力。由于它能够被生物体的蛋白质合成机制掺入新生多肽中,HPG常被用于活细胞或组织中的新蛋白合成示踪,尤其在神经元标记、神经活动追踪及可视化合成蛋白的研究中极具应用价值。

HPG的标记机制依赖于“无甲硫氨酸条件”的蛋白合成过程。在标准实验中,将细胞或神经元置于不含甲硫氨酸的培养基中,同时加入HPG,使其在翻译时替代甲硫氨酸插入到新生蛋白中。由于HPG包含末端炔基,可通过Cu(I)-催化的叠氮-炔点击反应(CuAAC)与荧光叠氮探针(如Alexa Fluor azide)或生物素叠氮衍生物发生共价连接,实现新合成蛋白的荧光可视化或富集分析。

关键反应条件如下:

细胞处理阶段:将神经元或其他细胞在去甲硫氨酸培养基中培养,加入50–100 µM HPG,一般孵育30分钟至数小时。培养时间长短根据蛋白合成速率和研究需求而定。

固定与渗透:孵育结束后用4%多聚甲醛固定细胞,并使用0.1–0.5% Triton X-100 渗透细胞膜以便反应物进入细胞内部。

点击反应:点击反应混合液中包含CuSO₄、还原剂(如抗坏血酸或TCEP)、叠氮荧光探针(一般浓度为1–10 µM)和稳定配体(如THPTA或BTTAA)。反应在室温下避光进行30–60分钟即可完成。

洗涤与成像:反应完成后进行充分PBS清洗以去除未反应的探针,然后可进行荧光显微镜观察或流式细胞分析。

HPG点击标记系统具有高选择性、高信噪比和无创性,非常适合用于分析神经元突触形成、活动相关蛋白表达及神经发育等过程。

英文名称: L-Homopropargylglycine

中文名称: (S)-2-氨基-5-己炔酸

MF: C6H9NO2

MW: 127.14

CAS: 98891-36-2

L-Homopropargylglycine

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

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