iFluor 532 goat anti-rabbit IgG (H+L)的合成过程研究

iFluor 532 Goat anti-Rabbit IgG（H+L）是一种用山羊来源的二抗标记绿色荧光染料 iFluor 532 的复合抗体，可特异性识别兔IgG的重链和轻链。其合成过程研究集中在两个关键模块：抗体的高保真性修饰和荧光染料的稳定结合。

抗体的纯化与缓冲体系准备：首先，从山羊血清中通过亲和层析法（如Protein G或Protein A）纯化得到高纯度的抗兔IgG。随后将抗体缓冲液换为无胺的碳酸盐或PBS缓冲液，避免胺类物质与NHS酯反应。

荧光染料的激活与控制反应：采用 iFluor 532-NHS ester 作为染料，该酯在有机溶剂（如DMSO）中溶解后缓慢加入抗体溶液。通过控制染料/抗体摩尔比（一般为5:1到10:1）优化荧光信号与抗体活性之间的平衡。

标记反应条件研究：

pH控制在8.0-8.5，有助于胺基反应活性；

避光反应 1 小时，防止染料光漂白；

使用少量Tween-20以防抗体聚集。

去除游离染料：反应结束后采用超滤浓缩管或凝胶色谱柱进行脱盐和纯化，去除多余染料。确保制得抗体纯度高、背景低。

标记效率与质量分析：

分光光度计测定280 nm和532 nm吸收峰，计算染料/抗体摩尔比；

SDS-PAGE 检测抗体完整性；

ELISA 验证其结合兔IgG的一抗特异性。

产品名称：iFluor 532 goat anti-rabbit IgG (H+L)

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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