Fluorescein-hondroitin-Sulfate,FITC硫酸软骨素的纯化与表征
Fluorescein-chondroitin sulfate(FITC-CS)是通过将荧光素异硫氰酸酯(FITC)标记到硫酸软骨素链上形成的复合物,常用于研究细胞外基质、细胞黏附及信号转导。其纯化和表征是确保标记成功和功能稳定的关键环节。
纯化步骤:
反应终止与初步纯化
反应完成后,使用透析或超滤去除未反应的游离FITC和低分子杂质。透析一般在冷 PBS 缓冲液中进行,周期性更换缓冲液,直至检测不到自由荧光素。
凝胶过滤色谱
进一步采用凝胶过滤(如Sephadex G-25或G-50柱)分离不同分子量的标记产物,富集标记的FITC-CS大分子,去除残余小分子杂质。
高效液相色谱(HPLC)
必要时使用HPLC进行精细分离和纯度检测,结合荧光检测器鉴定标记物的纯度和同质性。
表征方法:
紫外-可见光吸收光谱
通过测定荧光素特征吸收峰(约490 nm),确认FITC成功结合,并估算标记度。
荧光光谱分析
检测激发和发射波长,验证荧光性能是否保持,荧光强度反映标记效率。
核磁共振(NMR)与傅里叶变换红外光谱(FTIR)
检测结构变化,确认FITC与硫酸软骨素的共价结合,分析基团特征峰。
产品名称:Fluorescein-hondroitin-Sulfate,FITC硫酸软骨素
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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