TRITC-ConA
TRITC-ConA,糖蛋白结合及细胞粘附机制研究的标志性试剂
产品名称
TRITC-ConA
四甲基罗丹明标记康可霉素A
Tetramethylrhodamine Isothiocyanate-Concanavalin A
一、产品简介
TRITC-ConA 是一种将荧光染料四甲基罗丹明异硫氰酸酯(TRITC)共价标记于康可霉素A(Concanavalin A,简称 ConA)上的糖结合荧光探针。ConA 是从剑豆(Canavalia ensiformis)中提取的一种四聚体植物凝集素,能够特异性识别并结合糖残基,特别是 α-D-甘露糖(mannose)和 α-D-葡萄糖(glucose)残基。将 TRITC 标记于 ConA 上,可获得具有红色荧光的糖识别工具,广泛用于细胞膜糖蛋白成像、内吞研究、细胞识别、糖类定位、细胞凋亡监测及组织糖基化检测等多个生物学与医学研究领域。
二、产品组成与原理
Concanavalin A(ConA)
分子量约 26 kDa(单体),以四聚体形式发挥功能;
来源于植物种子(主要为剑豆),具有甘露糖和葡萄糖的高亲和力结合位点;
依赖于钙离子和锰离子维持其活性;
在细胞膜糖链识别、免疫学研究中广泛应用。
TRITC(Tetramethylrhodamine isothiocyanate)
一种红橙色荧光染料;
激发波长:~540–555 nm,发射波长:~570–580 nm;
与蛋白质中赖氨酸残基的氨基发生共价结合,形成稳定的硫脲结构;
荧光强度高,耐光性中等,适用于共聚焦显微镜和流式细胞仪。
三、理化性质
项目 参数说明
组成 TRITC 共价标记 ConA 蛋白
分子量 约 104 kDa(四聚体)
激发波长(λex) 540–555 nm
发射波长(λem) 570–580 nm
颜色 橙红色粉末或溶液
状态 冻干粉末 / 液体溶液(可选)
纯度 ≥ 95%(SDS-PAGE或HPLC检测)
溶解性 易溶于PBS、Tris缓冲液、HBSS等中性水溶液
标记度(TRITC:ConA 摩尔比) 1–5(可定制)
四、产品优势
高特异性糖识别能力
能够精准结合细胞表面糖蛋白/糖脂中的甘露糖和葡萄糖残基,适用于糖链成像与定量分析。
明亮稳定的红橙色荧光信号
适合荧光显微镜、共聚焦、流式细胞仪等多平台检测,避免FITC通道干扰。
共价标记、稳定性高
采用稳定的异硫氰酸酯标记方法,结合稳定,不易解离或释放自由染料,背景低。
广泛适用性
可用于细胞、组织、糖链微阵列等不同系统,兼容多种生物标本和标记物。
五、应用领域
1. 细胞表面糖链标记与成像
标记富含甘露糖/葡萄糖的糖蛋白(如T细胞膜蛋白);
实时观察细胞糖类分布及变化(如分化、激活过程);
常用于、免疫细胞、干细胞等模型研究。
2. 流式细胞术分析(FACS)
高通量定量检测细胞膜糖类表达水平;
可结合CD抗体分析细胞亚群糖表达差异;
适用于多色标记实验,配合FITC/PE通道互补使用。
3. 内吞与胞吞机制研究
观察 TRITC-ConA 被细胞膜结合与胞吞进入细胞的动力学过程;
可结合LysoTracker等染料联合成像,追踪ConA在溶酶体路径。
4. 组织切片糖类定位与组织学研究
标记冷冻或石蜡切片组织中的糖类分布;
常用于肝脏、肾脏、组织糖基化水平比较。
5. 细胞凋亡研究
某些细胞凋亡状态下表面糖链暴露可被ConA识别;
可配合Annexin V等标记联合使用,构建细胞死亡多标检测体系。
六、使用建议
1. 复溶与储存
建议使用无菌PBS(pH 7.4)或HBSS复溶,终浓度 0.1–1 mg/mL;
避光,4°C短期储存,-20°C长期储存(避免反复冻融)。
2. 实验浓度参考
细胞染色:5–20 μg/mL;
组织切片:10–50 μg/mL;
流式细胞术:推荐起始浓度 10 μg/mL,根据实际优化。
3. 金属离子要求
为保证ConA糖识别能力,需添加 1 mM Ca²⁺ 和 1 mM Mn²⁺;
可在使用缓冲液中提前加入或与染料一起孵育。
4. 检测设置
荧光激发:540–555 nm;
荧光发射:570–580 nm;
可使用 TRITC、Texas Red 或 Cy3 滤光片通道。
七、注意事项
ConA 对多种细胞有凝集活性,高浓度可能导致细胞聚集;
TRITC易受光漂白影响,建议避光操作并迅速观察;
某些细胞系(如低糖表达细胞)对ConA反应较弱,建议结合阳性对照;
若用于免疫组织化学,请确保组织预处理步骤保留糖残基完整性。
八、规格与包装
规格 建议用途
0.1 mg 初筛实验、标记验证
0.5 mg / 1 mg 常规细胞成像、流式实验
5 mg / 10 mg 组织标记、大量细胞分析
50 mg / 100 mg 项目开发、大规模检测
可根据需求定制不同标记度、金属离子复合型、无糖版本等。
九、技术服务支持
我们可提供以下定制服务与技术资料:
TRITC-ConA 标记度分析报告;
多色标记共染优化建议;
TRITC-ConA结合糖类微阵列分析;
SDS-PAGE、UV、HPLC检测报告;
同步提供 FITC-ConA、Cy5-ConA、Biotin-ConA 等产品供对照使用。
十、总结
TRITC-ConA 是一款理想的细胞膜糖蛋白标记探针,结合了 ConA 的糖类特异识别能力与 TRITC 的明亮红橙色荧光特性,适用于细胞表面糖分布分析、胞吞研究、流式检测、组织学成像等多种实验。其荧光性能稳定、特异性强、信号清晰,是细胞与糖类研究的重要工具试剂。
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厂家:西安齐岳生物科技有限公司
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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