FITC-刀豆球蛋白A
FITC-ConA:用于糖基化分析与细胞表面标记的绿色荧光探针
FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A, ConA)产品信息介绍
一、产品简介
FITC-刀豆球蛋白A(FITC-Concanavalin A,简称FITC-ConA)是将天然来源的刀豆球蛋白A(ConA)通过荧光素异硫氰酸酯(FITC)进行共价标记制备的荧光标记蛋白。ConA是一种从刀豆(Canavalia ensiformis)种子中提取的植物凝集素,具有特异性识别和结合糖类结构的能力,尤其对α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基具有高度亲和力。
FITC标记后,刀豆球蛋白A在保留糖结合活性的基础上,赋予其绿色荧光特性(激发波长约490 nm,发射波长约520 nm),方便通过荧光显微镜、流式细胞术等技术进行检测和定量分析。该产品广泛应用于细胞表面糖链的识别、细胞膜糖蛋白分析、组织切片染色及糖类相关生物过程研究。
二、结构特性及标记原理
刀豆球蛋白A是四聚体蛋白,分子量约为104 kDa,由四个亚单位组成,每个亚单位约26 kDa。其结构中存在多个结合位点,能够特异性识别细胞表面的糖基结构。ConA的糖结合位点对糖类分子的识别依赖于钙离子和锌离子的协同作用,结合特异性强,且可被特定糖类抑制。
FITC通过异硫氰酸基团与ConA的赖氨酸残基自由氨基共价结合,形成稳定的荧光标记蛋白。标记过程中严格控制FITC与ConA的摩尔比,确保标记效率和糖结合活性之间的平衡,避免过度标记导致活性降低。
三、产品规格与技术参数
参数 说明
标记染料 荧光素异硫氰酸酯(FITC)
载体蛋白 刀豆球蛋白A(Concanavalin A)
分子量 约104 kDa(四聚体)
荧光激发波长 490 nm
荧光发射波长 520 nm
纯度 ≥ 95%
产品规格 1 mg、5 mg、10 mg等多种规格
溶解性 PBS缓冲液、纯化水良好溶解
储存条件 -20℃避光保存
标记度 通常为3-7个FITC分子/ConA分子
四、主要应用领域
细胞膜糖蛋白及糖链研究
FITC-ConA特异性结合细胞表面α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖残基,常用于细胞表面糖蛋白的检测和定量,是研究细胞膜糖基化状态及变化的理想工具。
组织切片及免疫组织化学
利用其荧光标记的特点,可对组织切片中糖类分布进行定位和定量分析,广泛应用于组织、炎症反应和发育生物学等研究领域。
细胞识别与分选
结合流式细胞仪,FITC-ConA用于识别特定糖基表达的细胞亚群,实现细胞分选和功能分析。
糖类代谢与信号传导研究
通过检测糖蛋白和糖链结构的变化,FITC-ConA帮助解析糖类在细胞信号传导和代谢调控中的作用。
病理学及疾病机制探索
糖基化异常常与癌症、糖尿病等疾病相关,FITC-ConA作为糖链探针,有助于疾病诊断和机制研究。
五、使用方法简述
1. 溶解及储备
将FITC-ConA用PBS缓冲液(pH 7.4)或纯化水轻柔溶解,常制备成1 mg/mL储备液,避免剧烈振荡导致蛋白变性。
2. 细胞及组织染色
细胞染色:孵育细胞于含FITC-ConA的缓冲液中(一般浓度5-50 µg/mL),37℃孵育30分钟至1小时,随后用PBS洗涤去除游离探针。
组织切片染色:将切片用FITC-ConA溶液孵育,充分结合糖类结构后进行洗涤和显微镜观察。
3. 流式细胞术
将细胞悬液与FITC-ConA混合,适当孵育后通过流式细胞仪进行荧光检测和分析。
4. 抑制实验
为验证结合特异性,可在孵育体系中加入高浓度的甘露糖或葡萄糖作为竞争抑制剂,观察结合信号的变化。
5. 荧光检测
利用荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪检测FITC荧光信号,采集图像并进行定量分析。
六、储存条件与稳定性
建议-20℃冰箱避光保存,防止荧光素光漂白。
避免反复冻融,使用时分装保存。
正确储存条件下,产品稳定性可达6个月以上。
溶液制备后建议尽快使用,避免长时间保存影响活性和荧光强度。
七、安全性及注意事项
本产品仅限科研使用,禁止临床及诊断用途。
操作时请佩戴手套、护目镜及实验服,避免与皮肤和眼睛直接接触。
废弃物应按生物化学废弃物规范处理。
避免剧烈震荡和高温,防止蛋白质变性和荧光强度降低。
在使用过程中注意避免光照,减少荧光素光漂白。
八、技术支持与服务
我们为用户提供全方位技术支持:
标记度检测与优化方案。
染色及实验设计指导。
数据处理与结果分析咨询。
定制化标记服务及规格调整。
如您在实验中遇到任何问题,欢迎随时联系我们的技术团队获得帮助。
九、总结
FITC标记的刀豆球蛋白A因其特异性的糖类结合能力和优异的荧光性能,成为细胞生物学、分子医学、组织学及病理学领域的理想工具。该产品不仅方便实现细胞表面糖链的可视化检测,还能助力糖基化相关疾病机制的研究和诊断开发。
选择高质量的FITC-ConA,有助于提高实验的灵敏度和特异性,为科学研究提供可靠支持,推动生命科学领域的深入探索与创新。
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用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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