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ConA-CY3,CY3-标记ConA作为糖链识别探针的构建与应用
发布时间:2025-06-13     作者:ssl   分享到:

CY3-标记ConA作为糖链识别探针的构建与应用

ConA-CY3

产品名称:CY3标记刀豆蛋白A

英文名称:Concanavalin A–Cy3(ConA-CY3)

CAS号:11028-71-0(未标记ConA)

分子量:约104 kDa(四聚体)

荧光特性:激发波长 550 nm,发射波长 570 nm(Cy3)

形式:冻干粉末或液体(PBS溶液)

保存条件:-20°C避光储存

纯度:≥95%(SDS-PAGE)

用途:糖类识别、糖蛋白成像、细胞膜糖链研究、荧光成像、流式细胞术等


一、产品简介

ConA-CY3 是一种以刀豆蛋白A(Concanavalin A)为基础,通过共价结合荧光染料Cy3(Cyanine 3)而制得的荧光标记凝集素。ConA 是从刀豆(Canavalia ensiformis)中提取的植物凝集素,能特异性地识别 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖残基,广泛用于糖类识别、糖蛋白检测、细胞膜糖链成像等研究。

CY3 是一种性能优异的橙红色荧光染料,具有高量子产率、良好的光稳定性和适中的水溶性。在 ConA 上标记 Cy3,可实现对糖类结构的荧光可视化,尤其适用于共聚焦显微镜、流式细胞术、荧光染色与定量分析等实验。


二、ConA-CY3 的结构与标记方式

ConA 是一种金属依赖型四聚体蛋白,天然状态下分子量约为104 kDa。每个单体约26 kDa,能识别糖链中的非还原末端甘露糖和葡萄糖。其结合活性依赖于 Ca²⁺ 和 Mn²⁺ 的存在。

Cy3染料通常以NHS酯形式与ConA蛋白表面赖氨酸残基共价偶联。我们优化了反应条件,确保Cy3标记度处于1~3 mol Cy3/mol ConA之间,在保留糖结合活性的同时提供强烈且稳定的荧光信号。


三、产品特点

高特异性识别能力:ConA-CY3可高效识别糖蛋白或细胞表面的α-D-甘露糖和α-D-葡萄糖结构。

强荧光信号:Cy3荧光亮度高,适用于激光共聚焦、TIRF、流式细胞术和活体成像。

低背景、高灵敏度:去除游离Cy3染料,确保图像清晰、背景干净。

适用范围广:适用于细胞、组织切片、糖蛋白芯片、凝集素芯片等不同平台。

兼容性好:可与FITC、Cy5、DAPI等染料组合用于多通道分析。

ConA-CY3,CY3-标记ConA

四、应用方向

1. 细胞膜糖链成像

ConA-CY3 可用于荧光显微镜下观察细胞表面糖链分布,特别适用于细胞、干细胞、神经元等类型。

2. 糖蛋白检测与成像

用于检测糖蛋白(如IgG、EPO、黏附因子等)中的甘露糖/葡萄糖残基,可应用于Western blot、芯片杂交、组织染色等。

3. 流式细胞术分析

可用于标记不同细胞群体表面糖链表达水平,辅助筛选细胞亚群或疾病表型标志物。

4. 糖芯片与凝集素芯片研究

ConA-CY3作为探针可用于检测芯片上不同糖结构的结合能力,用于筛选糖类识别模式、生物标志物开发。

5. 细胞粘附与信号传导研究

ConA 能诱导糖蛋白聚集,结合CY3标签可实时追踪糖链介导的细胞粘附及信号转导过程。

6. 疾病模型研究

研究中发现细胞、炎症细胞表面糖链常发生改变,ConA-CY3可用于筛查相关异常表达模式,辅助疾病诊断。


五、使用建议

使用方式 推荐浓度 操作提示

细胞标记 5–25 μg/mL 可用于贴壁或悬浮细胞,标记前建议去除血清残留

组织染色 10–50 μg/mL 石蜡切片或冰冻切片均可,需加Ca²⁺/Mn²⁺维持活性

流式细胞术 1–10 μg/mL 推荐与其他抗体共用,需设阴性对照

糖蛋白检测 适当优化 根据被检蛋白糖链含量调节浓度

注意事项:

溶液中加入1 mM CaCl₂ 与1 mM MnCl₂可增强结合活性

标记过程中应避免使用甘露糖或葡萄糖等竞争底物

避光操作以防荧光信号衰减

可结合ConA未标记版本设对照组分析结合特异性


六、质量控制标准

检测项目 指标

蛋白纯度 ≥95%(SDS-PAGE)

标记度 1–3 mol Cy3/mol ConA

游离染料残留 <2%(层析检测)

生物活性 保留原ConA对甘露糖/葡萄糖识别功能

无菌/内毒素版本 可定制


七、包装与定制服务

规格 形式 储存条件

100 μg 冻干/液体 -20°C避光

500 μg 冻干/液体 -20°C避光

1 mg 冻干/液体 -20°C避光

可定制 共标、低内毒素、特定标记度

支持服务:

双染(FITC/Cy3、Cy3/Cy5 等)

定制糖结合强度或低内毒素版本

特殊缓冲体系(Tris、HEPES等)


八、文献与应用案例

文献示例:

Zhang et al., Glycobiology, 2022: Cy3-ConA for glycoprotein mapping in cancer cells

Li et al., Bioconjugate Chemistry, 2023: Lectin imaging of neural stem cells using Cy3-ConA

客户反馈:

“染色图像清晰,细胞膜成像对比度高”

“用于流式分群效果理想,结合特异性强”

“与Cy5标记抗体组合可用于双通道糖蛋白共定位研究”


九、结语

ConA-CY3 是一款兼具高特异性识别与荧光成像能力的经典生物试剂,广泛适用于糖生物学、细胞生物学、标志物筛查、流式检测等研究。其灵敏、稳定、易于使用的特性,使其成为糖链相关科研中的重要工具。如果您有定制需求(如双标记、低内毒素、封闭糖结合位点等),欢迎联系我们获取技术支持与报价信息。

西安齐岳生物 — 多样化荧光标记服务

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!

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