FITC-PE,异硫氰酸荧光素-磷脂酰乙醇胺的合成步骤概述
FITC-PE 是指将荧光染料 FITC(Fluorescein isothiocyanate)标记至磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine, PE)上的荧光脂质探针,用于脂质体示踪、膜融合实验、细胞膜成像及药物载体荧光示踪。其合成依赖于FITC与PE分子中乙醇胺头部的一级胺之间的化学偶联反应。
合成步骤如下:
反应准备:选用高纯度的或合成PE(如1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine,DPPE),溶解于适量的干燥氯仿/甲醇(2:1)混合溶剂中。FITC 通常先溶于少量 DMSO 或干燥乙醇中,以提高溶解性。
反应混合:将 FITC 溶液缓慢滴加至 PE 溶液中,反应体系中加入碳酸氢钠缓冲液(pH 8.5)以促进异硫氰酸酯基团与氨基反应。整个反应于避光、室温或轻微加热(25–37℃)条件下进行,时间约12–24小时。
纯化步骤:反应完成后,使用薄层色谱(TLC)或柱层析分离产物,通常采用硅胶柱以除去游离的 FITC 和未反应的原料。适用于极性溶剂体系(如氯仿/甲醇/水)。此外,HPLC也可用于高纯度要求的分离。
产物干燥与储存:合成的 FITC-PE 应低温避光保存于-20℃,溶于氯仿中备用。避免长时间暴露于空气和光照下,以免荧光团降解。
验证手段:利用 UV-Vis 和荧光光谱确认激发/发射峰(495/520 nm),结合质谱或NMR进一步确认结构;TLC与HPLC峰型对比可用于产物纯度评价。
产品名称:FITC-PE,异硫氰酸荧光素-磷脂酰乙醇胺
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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