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FITC-ConA,异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A的结构合成
发布时间:2025-06-13     作者:axc   分享到:

FITC-ConA,异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A的结构合成

FITC-ConA 是通过共价结合荧光染料 FITC(Fluorescein Isothiocyanate)与刀豆球蛋白A(Concanavalin A, ConA)制备而成的荧光标记凝集素探针,用于糖类识别、糖蛋白成像、细胞膜糖链研究及组织特异性染色。ConA 是一种来源于刀豆的四聚体植物凝集素,分子量约为104 kDa,具有专一性识别 α-D-甘露糖和 α-D-葡萄糖残基的能力。

FITC 与 ConA 的结合基于异硫氰酸酯与蛋白质上的伯胺(主要来自赖氨酸残基)发生反应生成稳定的硫脲键。

合成步骤包括:

缓冲液准备:ConA 通常溶于 pH 8.3 的碳酸氢钠缓冲液中,以确保赖氨酸氨基处于去质子状态,有利于亲核攻击 FITC 的异硫氰酸酯基团。

FITC溶液制备:FITC 先溶解于无水 DMSO 中,避光处理,保持浓度在 1–2 mg/mL,确保反应效率。

偶联反应:将 FITC 缓慢加入 ConA 溶液中,典型摩尔比为 FITC : ConA = 3–5 : 1,反应在避光、室温条件下进行2小时。

终止与纯化:反应完成后用氨基酸或Tris缓冲液封闭未反应的 FITC,随后采用透析(10 kDa MWCO)或 Sephadex G-25 层析柱去除游离 FITC。

结构验证:采用 UV-Vis 光谱(280/495 nm)测定标记度(FITC/ConA molar ratio),并可通过 SDS-PAGE 联合荧光成像确认标记成功。

FITC-ConA 保留了 ConA 的糖识别能力,荧光标记不干扰其与糖残基结合的四聚体构象,适用于荧光显微镜、流式细胞术或糖类生物材料的构建分析,是一类经典的糖生物学探针。

产品名称:FITC-ConA,异硫氰酸酯-刀豆球蛋白A

纯度:95%+

性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。

溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

FITC-ConA

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