FITC-ConA,荧光素-刀豆球蛋白A的反应机制
FITC(荧光素异硫氰酸酯)与刀豆球蛋白 A(ConA)的偶联基于化学共价标记反应。ConA 是从刀豆(Canavalia ensiformis)中提取的植物凝集素,含有 4 个亚基,每个亚基含 1 个糖结合位点,其活性依赖于 Ca²⁺和 Mg²⁺的存在。FITC 的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)在碱性条件下(pH 8.0-9.0)可与 ConA 中赖氨酸残基的 ε- 氨基(-NH₂)发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键(-N-C-S-),从而将荧光素共价连接到 ConA 分子上,生成 FITC-ConA 偶联物。该标记过程不破坏 ConA 的糖结合活性,但可能影响其寡聚化状态(ConA 在溶液中可形成四聚体)。
二、糖结合反应机制
特异性糖识别
ConA 的糖结合位点对α- 甘露糖(α-Man)、α- 葡萄糖(α-Glc)和 α- 果糖(α-Fru) 具有高度特异性,尤其偏好末端带有这些糖残基的糖链(如糖蛋白、糖脂或多糖)。其结合机制依赖于:
氢键与疏水作用:ConA 的氨基酸残基(如 Arg、Asp、Glu)与糖分子的羟基形成氢键,同时糖环的疏水部分与 ConA 的疏水口袋结合。
金属离子辅助:Ca²⁺和 Mg²⁺通过配位作用稳定糖分子与 ConA 的结合构象,缺失金属离子会显著降低结合亲和力。
细胞表面糖链的结合模式
在生物样本中(如细胞、组织切片),FITC-ConA 可与细胞膜表面糖蛋白(如整合素、受体蛋白)或糖脂上的 α- 甘露糖 / 葡萄糖残基结合。例如,免疫细胞表面的甘露糖受体、肿瘤细胞异常表达的糖链等,均可成为 FITC-ConA 的靶点。结合后,荧光素在 488 nm 激发光下发射绿色荧光(峰值约 520 nm),通过荧光显微镜或流式细胞术可直观观察其分布。
产品名称:FITC-ConA,荧光素-刀豆球蛋白A
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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