CY3.5-Ovalbumin
CY3.5-Ovalbumin用于抗原呈递机制的可视化研究
CY3.5-Ovalbumin 产品信息介绍
一、产品概述
CY3.5-Ovalbumin 是将荧光染料 CY3.5 通过共价方式标记在卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)分子上制备而成的一种高效荧光示踪分子。卵清蛋白是从鸡蛋蛋清中提取的一种高纯度蛋白质,常用于免疫学、抗原递呈、T细胞激活以及胞内转运等机制研究。通过与 CY3.5 荧光染料结合,该产品不仅保留了卵清蛋白的天然抗原性,还具备鲜明的红橙色荧光特性,非常适合用于细胞摄取成像、DC细胞抗原递呈实验、跨膜转运追踪及纳米载体功能验证等领域。
CY3.5 是一种中红光荧光染料,具有高荧光强度和良好的光稳定性,其发射波长位于 596 nm 左右,避免了与常用的 FITC、DAPI 等染料的激发发射光谱重叠,在多色共聚焦成像中具有极大的优势。
二、产品组成与结构特点
1. 卵清蛋白(Ovalbumin, OVA)
卵清蛋白是鸡蛋蛋清中主要的蛋白质,分子量约为 45 kDa,约含 385 个氨基酸残基。其优点包括:
高纯度、稳定性好;
免疫原性强,广泛用于抗原递呈研究;
细胞摄取效率高,适合DC树突状细胞等的内吞研究;
与T细胞识别系统(如OT-I/OT-II)配套使用广泛。
2. CY3.5 荧光染料
CY3.5 是 Cyanine 系列荧光染料的一员,具有以下优势:
激发波长(Ex):~581 nm
发射波长(Em):~596 nm
荧光强度高,抗光漂白性强
不易自聚,背景信号低
适合激光共聚焦、荧光显微、活体成像及流式细胞术
通过 NHS 活性酯将 CY3.5 共价接枝到 OVA 分子中的赖氨酸残基上,形成稳定的酰胺键连接,既保持了蛋白的结构功能,又确保了荧光的稳定输出。
三、产品特性与优势
特性 优势说明
荧光稳定 CY3.5 发光效率高,光漂白慢,适合长期成像实验
抗原性保留 OVA 结构保持完整,适合抗原递呈、免疫反应研究
标记均一 控制染料/蛋白比(D/P)在合理范围(一般为 3–10),避免过度修饰影响功能
生物相容性强 适用于细胞实验与体内成像研究
多平台适用 可用于流式细胞仪、激光共聚焦、活体荧光成像、小动物示踪
四、应用方向与实验用途
1. 抗原递呈研究
CY3.5-OVA 是经典的模型抗原,用于研究 MHC I 与 MHC II 通路中的抗原处理与递呈机制,特别适合 DC 树突状细胞内吞后的荧光成像。
2. T细胞活化研究
可与 OT-I(识别OVA257–264)或 OT-II(识别OVA323–339)转基因小鼠T细胞配合使用,用于体内免疫应答机制探究。
3. 纳米载体递送验证
CY3.5-OVA 可作为蛋白类模型药物负载到多种纳米系统中,如脂质体、聚合物微球等,验证其载药能力、释放行为与靶向性。
4. 细胞摄取与胞内定位
在 RAW264.7、DC2.4、THP-1 等免疫相关细胞系中,可用作摄取能力评估、内体-溶酶体共定位实验。
5. 跨膜转运路径分析
通过细胞荧光追踪,可研究胞吞、胞吐、胞内运输等机制,尤其适合配合 LysoTracker、EndoTracker、DAPI 等染料共染观察。
五、技术参数信息
项目 参数说明
产品名称 CY3.5-Ovalbumin
蛋白来源 鸡卵清蛋白(≥98%纯度)
荧光染料 CY3.5(Cyanine类)
激发波长(Ex) ~581 nm
发射波长(Em) ~596 nm
荧光颜色 橙红色
标记度(Dye/Protein) 3–10(可按需定制)
分子量 ~45 kDa(蛋白本体)
外观 红橙色冻干粉或透明溶液
储存条件 -20℃避光保存
保质期 冻干1年,溶液6个月(避免反复冻融)
六、推荐使用方法
细胞实验(如DC细胞)
溶解样品:推荐用PBS或细胞培养基缓慢溶解冻干粉。
浓度选择:10–50 µg/mL 范围内设定浓度梯度。
共染实验:可与DAPI、LysoTracker等配合进行多通道观察。
孵育时间:一般为0.5–4小时,根据实验目的优化。
体内实验
小动物注射剂量:推荐0.5–2 mg/kg。
成像设备匹配:确保激发光源涵盖581 nm波段,并设置合适Em通道。
检测窗口期:注射后1–8小时内信号稳定,适合动态追踪。
七、注意事项
实验过程中需全程避光操作;
建议现配现用,避免反复冻融;
若为细胞实验,注意终浓度避免细胞毒性;
染料标记后的蛋白略有分子量变化,影响电泳迁移率属正常现象;
如需特定pH缓冲、包埋纳米系统或接枝靶向肽段,支持定制服务。
八、产品拓展与定制
CY3.5-Ovalbumin 还可作为功能模块用于以下拓展方向:
生物偶联平台构建:与纳米粒子、磁珠、量子点等结合;
靶向系统开发:可接枝PEG、靶向肽、抗体等;
多染料共标记体系设计:如与FITC-BSA、Cy5-Transferrin、TRITC-ConA等构建多色追踪系统;
动物疫苗递送研究模型:作为模型抗原负载于疫苗载体中,观察免疫效应。
九、总结
CY3.5-Ovalbumin 是一款功能强大、稳定可靠的荧光蛋白探针,兼具优异的免疫活性和出色的荧光性能。其在抗原递呈、免疫调控、纳米载体验证、胞内机制研究等多个领域均展现出良好的适用性与实用价值。对于开展免疫学、药物递送、生物材料研究的科研人员而言,CY3.5-Ovalbumin 是一个不可多得的高性能工具分子。
西安齐岳生物科技有限公司专注于高品质聚乙二醇(PEG)及其衍生物的研发与生产,提供涵盖线性PEG、支化PEG、多官能团PEG、嵌段共聚物PEG等在内的多种基础结构产品,广泛应用于生物医药、诊断试剂、纳米材料及化学合成等领域。公司具备灵活的定制能力,可根据客户需求提供特定分子量(200–20,000 Da)、官能团(如-NH₂、-COOH、-SH、-N₃、-Biotin、荧光标记等)以及不同结构的PEG修饰服务。凭借先进的合成平台与严格的质量控制体系,齐岳生物致力于为科研、药物开发和材料应用提供可靠、稳定、可追溯的PEG解决方案,支持客户实现从实验室研究到产业转化的各类需求。
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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