GDP-L-fucose-CY5，CY5标记GDP-L-岩藻糖的合成过程研究

GDP-L-fucose-CY5 是将活性糖基化底物 GDP-L-岩藻糖（Guanosine diphosphate-L-fucose）与近红外荧光染料 CY5 共价连接形成的荧光核苷酸糖探针，应用于糖基转移酶底物筛选、糖生物合成研究和细胞糖基化动态成像等领域。该探针结构特点在于保留了 L-fucose 的糖基结构及 GDP 的识别功能，同时通过 CY5 实现荧光追踪能力。

合成过程主要包括以下步骤：

功能位点选择与设计

GDP-L-fucose 分子含有多个羟基，合成中避免破坏糖苷键和磷酸基团活性。常选择在 GDP 的 2' 或 3'-OH 或 fucose 的羟基通过点击化学进行间接修饰。一般使用 L-fucose 衍生物（如 amino-fucose）与 CY5-NHS 或 CY5-alkyne 实现标记。

引入功能连接臂

使用带有叠氮基（azide）的修饰 GDP-L-fucose（例如 azido-propyl-GDP-fucose）作为前体，与含炔基的 CY5（如 CY5-alkyne）进行 CuAAC（铜催化叠氮-炔环加成）点击反应。此反应具有高选择性和温和条件，是实现糖探针构建的主流方式。

点击反应条件

反应体系：GDP-L-fucose-N₃ + CY5-alkyne + CuSO₄ + sodium ascorbate；

溶剂体系：DMSO/H₂O 或 Tris 缓冲液；

反应时间：室温或37°C，避光反应4~16小时。

纯化过程

由于产物极性强，常采用阴离子交换色谱（DEAE柱）或反相HPLC进行分离，收集特定荧光峰。纯化后可透析去除铜离子残留，得到稳定、可储存的水溶性产物。

产品名称：GDP-L-fucose-CY5

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.05.23