CY2-Lactic acid,近红外荧光乳酸探针的合成及纯化过程
CY2-Lactic acid 是将荧光染料 CY2(Cyanine 2)标记到乳酸分子上的小分子探针,具备绿色到近红外区的激发发射特性(Ex ~490 nm,Em 510520 nm),用于监测细胞代谢中乳酸的含量变化,常见于肿瘤细胞糖酵解活性分析、微环境酸性监测等领域。
合成流程如下:
前体分子设计
由于乳酸分子不含反应性氨基,通常采用间接偶联方式。先将乳酸与 ethylenediamine 或 PEG diamine 缩合形成 Lactic acid-PEG-NH₂ 结构,为后续的CY2染料提供反应位点。
染料活化
CY2常以活性酯形式存在(如 CY2-NHS ester),可与伯胺基形成稳定的酰胺键。使用 DMSO 或 DMF 溶解 CY2-NHS,配合缓冲液(pH 8.0~8.5)进行反应。
偶联反应
将 Lactic acid-PEG-NH₂ 溶于PBS或碳酸缓冲液;
加入适量CY2-NHS溶液(1.2 eq);
避光、室温反应6~12小时;
偶联效率受pH、比例及时间影响。
纯化过程
使用透析袋(MWCO 1~3 kDa)去除小分子杂质;
或使用反相C18柱层析纯化,采用梯度洗脱(5%–80%乙腈)收集发绿光组分;
可进一步采用HPLC检测单峰和纯度。
表征方法
UV-Vis光谱检测吸收波长约490 nm;
荧光光谱(λex = 490 nm, λem = 510–520 nm)确认荧光活性;
LC-MS确认目标产物结构和纯度;
若连接PEG,也可用NMR分析氢谱验证。
CY2-Lactic acid 在细胞外代谢物检测、乳酸敏感纳米系统、肿瘤微环境动态成像中应用,具备水溶性好、荧光信号稳定、定位精度高等优点。
产品名称:CY2-Lactic acid
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
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