CY5.5-Antioxidase,CY5.5-抗氧化酶的反应条件
CY5.5-酶是一种将近红外花菁染料CY5.5共价偶联到酶(如超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT等)上的荧光标记物,主要用于酶活性研究、细胞成像及氧化应激监测。其标记过程涉及CY5.5的活性基团(一般为NHS酯)与酶蛋白表面赖氨酸残基的自由氨基发生酰胺键形成共价结合。
反应条件:
缓冲体系:
通常选用pH 7.4左右的PBS缓冲液,或pH 8.0的碳酸盐缓冲液(0.1 M NaHCO₃),以保证蛋白质稳定且有利于NHS酯的活性发挥。
染料溶解:
CY5.5-NHS酯先溶于无水极性有机溶剂(如DMSO或DMF),再加入酶液中进行反应,避免染料水解失活。
反应温度与时间:
反应一般在室温(20-25℃)条件下进行,时间控制在1~2小时,确保标记效率同时防止酶活性损失。
摩尔比:
染料与酶的摩尔比一般控制在5:1至10:1之间,保证足够标记且不引起蛋白聚集或沉淀。
终止反应:
标记完成后加入羟胺或氨基乙醇终止未反应的NHS酯,以避免非特异性交联。
纯化处理:
采用凝胶过滤、透析或超滤等方法去除游离染料,获得纯净的CY5.5-酶。
保存条件:
标记产物存于含有甘油的缓冲液中,低温避光保存,保持荧光和酶活性稳定。
总结,CY5.5-酶的制备需控制pH、温度和反应时间,以保证高效偶联及酶的功能完整,满足生物成像和功能检测需求。
产品名称:CY5.5-Antioxidase,CY5.5-抗氧化酶
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应各种荧光染料,包括CY系列、FITC、Rhodamine、Bodipy系列染料、Coumairn 染料、Dansyl染料、FAM/5-TAMRA、NBD、ICG及IR系列、ATTO系列染料、AMCA、Perylene、碘化物、DIR/DIL/DIO/DID/DAPI细胞膜染料等等,提供各种荧光(CY系列、FITC、香豆素、罗丹明等)荧光染料标记的定制服务
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.05.23