文献:In Situ Membrane Biotinylation Enables the Direct Labeling and Accurate Kinetic Analysis of Small Extracellular Vesicles in Circulation

文献链接：https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.1c01176

作者：Zi-Li YuYi ZhaoFan MiaoMin WuHou-Fu XiaZhuo-Kun ChenHai-Ming LiuYi-Fang ZhaoGang Chen*

摘要

DSPE-PEG-Biotin

循环小细胞外囊泡（sEVs）是天然存在的纳米级膜囊泡，在细胞之间传递生物活性分子。传统上，为了评估它们在体内的行为，循环的sEV必须从血液中分离出来，然后在体外用成像材料标记，最后注射回动物的循环中进行后续检测。

繁琐的分离-标记-再融合程序可能会对循环sEV的自然特性产生不利影响，从而改变它们的行为和体内检测到的动力学。在此，我们提出了一种原位生物素化策略，用静脉注射的DSPE-PEG生物素直接标记循环sEV，旨在更生物友好和准确地评估循环sEV的体内动力学。这种分析策略没有隔离-标记-再融合程序，对sEV的自然行为没有不利影响。

结果显示，小鼠中通用循环sEV的寿命约为3天。此外，我们首次揭示了不同细胞来源的循环sEV亚群的不同体内动力学，其中红细胞来源的sEV寿命长。此外，与原位循环sEVs或用作自体移植相比，用作同种异体移植的循环sEVs的寿命短。

此外，原位生物素化策略还为生物素化循环sEVs的富集提供了一种方法。总之，本研究为循环sEV的原位标记提供了一种新策略，这将有助于准确表征其体内动力学，从而加速其作为生物标志物和治疗载体的未来应用。

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