文献:DSPE-PEG Modification of α-Conotoxin TxID
文献链接:https://www.mdpi.com/1660-3397/17/6/342
DSPE-PEG-TxID的合成与鉴定
在这项研究中,肽链采用了标准的Fmoc固相肽合成策略。α-芋螺毒素TxID通过两步氧化成功合成,并通过制备型HPLC纯化。通过RP-UPLC监测纯度,通过ESI-MS鉴定分子量。TxID的保留时间为19.13分钟。所有完全折叠的肽的纯度均在95%以上。ESI-MS用于确认TxID的分子量为1489.00 Da,m/z为746.25 Da[m+2H]2+,这与其理论平均质量1489.68 Da一致。
靶向共聚物DSPE-PEG-TxID是通过NHS和TxID N端之间的亲核取代反应合成的,如图2A所示。根据HPLC色谱图,未反应的TxID保留时间为19.13分钟,这意味着TxID的峰没有受到DSPE-PEG-NHS的干扰。如MALDI-TOF MS光谱所示,最终产物的分子量(MW)均与DSPE-PEG-TxID的理论MW一致。分子量为3686.10和4327.40 Da的两种单体与由DSPE-PEG-NHS衍生的DSPE-PEG-TxID的理论分子量一致,分子量约为2312.13和2951.92 Da,证实所得产物是目标化合物DSPE-PEG-TexID。在局部放大,由于钠和钾离子在质谱检测过程中不可避免地混合在一起,红色峰表示DSPE-PEG-NHS的分子量,黑色峰表示DSPE-PEG-NHS加钠离子的分子量。
通过HPLC监测系统优化,以确定不同反应条件下多肽的剩余量,剩余的小值表明多肽在反应条件下具有高的转化率,反之亦然。
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