文献：阿昔替尼与PD-L1 siRNA联合给药，协同血管正常化和免疫检查点抑制，增强*癌免疫力

链接：https://link.springer.com/article/10.1186/s12951-025-03170-y

作者： 刘艳红，龚黎明景峰，肖聪聪，刘晨飞，陈博涵，陈丽清，金明吉，关友彦，高忠高&黄伟 

节选：

DSPE-PEG2000-NGR的合成

DSPE-PEG2000-NGR 的合成依据先前的研究进行，并略作修改 [ 41 ]。简而言之，将 50 mg NGR 肽和 154 mg DSPE-PEG2000-MAL 充分溶解于 10 mL HEPEs 溶液（pH 8.0）中，并在 N2 保护下于室温搅拌 24 h 。反应结束后，使用透析袋（MWCO 2500）去除游离肽，并通过冻干获得最终产品。DSPE-PEG2000-NGR 的结构和分子量分别通过1 H NMR 光谱和 MALDI-TOF MS 证实。

Axi/siRNA PD−L1 @NGR-Lipo的制备及表征

首先利用鱼精蛋白与siRNA PD − L1的电荷相互作用制备Pro-siRNA PD−L1。将鱼精蛋白和siRNA PD−L1以不同质量比（5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1）等体积混合，涡旋5 min，孵育后即得Pro-siRNA PD−L1 。随后采用薄膜分散法制备Axi/siRNA PD−L1 @NGR-Lipo。具体而言，将1 mg阿昔替尼充分溶解于甲醇中，然后加入到含有4 mg胆固醇、20 mg DOPC和4 mg DSPE-PEG2000-NGR的二氯甲烷溶液中。将混合物在40 ℃减压下通过旋转蒸发仪形成磷脂薄膜，并除去残留的有机溶剂。随后，将磷脂膜在40°C下用水水化30分钟。在探针超声条件下，在冰水中以60 W超声20分钟后获得Axi@NGR-Lipo。之后，将Pro-siRNA PD -L1与Axi@NGR-Lipo充分混合。使用脂质挤出机（Avanti Polar Lipids）通过0.22μm聚碳酸酯膜过滤器挤出20次，获得Axi/siRNA PD-L1 @NGR-Lipo。Axi/siRNA PD-L1 @Lipo的制备步骤与上述类似，只是将DSPE-PEG2000-NGR替换为DSPE-PEG2000。

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