文献:以plectin-1为靶向的光学磁多模态成像技术对小鼠原位胰腺导管腺癌的精准检测
链接:https://www.thelancet.com/journals/ebiom/article/PIIS2352-3964(22)00221-3/fulltext?uuid=uuid%3A397ac98d-28fd-4fbf-9b67-e1affb9574c5
作者:张文佳,梁小龙,梁祝,张新宇,金正宇,杨 度,田 杰,薛华丹
节选:
DSPE-PEG-PTP的合成
DSPE-PEG-PTP 是通过酰胺键将 PTP 的氨基与 DSPE-PEG-NHS 酯结合而合成的。28简而言之,将 DSPE-PEG-NHS 和 PTP 以 1:2 的摩尔比在水性缓冲液(pH 8.5-9.0)中混合,然后在 37°C 下孵育 4 小时。使用分子量截留值为 8,000-14,000 的透析袋纯化所得混合物以去除未结合的 PTP,冻干并在 -20°C 下储存直至进一步使用。DSPE-PEG-Con 以类似的方式合成。
PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW纳米粒子的制备
PTP多肽序列为KTLLPTP(南京天肽生物科技有限公司)。对照多肽为随机合成的多肽,其相对分子质量与含有GTDYEW序列的PTP多肽(南京天肽生物科技有限公司)基本相同。采用自组装法,通过疏水作用力制备PTP和IRDye800CW修饰的Fe 3 O 4。具体方法为:将油酸修饰的Fe 3 O 4与磷脂(其中DSPE-PEG-PTP、DSPE-IRDye800CW和DSPC的摩尔比为30:10:60)以1:2的质量比混合于氯仿中,超声搅拌以确保Fe 3 O 4充分溶解。随后,用氮气在25 °C下缓慢蒸发样品,使其在小瓶上形成一层薄膜。随后加入2 mL水,并剧烈超声处理1小时。之后,用尼龙滤膜(0.45 µm)过滤样品,以去除较大的聚集体。将滤液离心(25,000 rpm,每次0.5小时,3次),收集PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW水相。通过荧光光谱和电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)测定滤液、上清液和悬浮沉淀物,从而测定IRDye800CW和Fe 3 O 4的浓度。采用相同方法制备Con-Fe 3 O 4 -IRDye800CW纳米颗粒。采用Zetasizer Nano ZS90仪器在室温下测定PTP-Fe 3 O 4 -IRDye800CW和Con-Fe 3 O 4 -IRDye800CW的zeta电位值。
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