文献:
Targeting Fluorescence Imaging of RGD-Modified Indocyanine Green Micelles on Gastric Cancer
文献链接:
https://www.frontiersin.org/journals/bioengineering-and-biotechnology/articles/10.3389/fbioe.2020.575365/full
作者:
Jun Shao&#x;Jun Shao1†Xiaoming Zheng&#x;Xiaoming Zheng1†Longbao FengLongbao Feng2Tianyun LanTianyun Lan3Dongbing DingDongbing Ding1Zikai CaiZikai Cai1Xudong ZhuXudong Zhu1Rongpu LiangRongpu Liang1Bo Wei*Bo Wei1*
细胞系和小鼠
本文使用SGC7901细胞、小鼠成纤维细胞L929。SGC7901细胞在RPMI 1640中培养,而L929细胞在37°C、含5%CO2的加湿气氛中在DMEM中培养。所有培养基均补充了10%FBS、1%青霉素和1%链霉素。
细胞摄取
通过激光共聚焦荧光显微镜观察细胞的内化和分布。简而言之,将SGC7901细胞接种在35 mm细胞培养皿(Nest,801002)中,培养24小时以进行细胞附着。每皿细胞密度为5×104。
接下来,用含有以下成分的新无血清培养基替换培养基DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG(等效ICG浓度:1mg/ml)。孵育4和12小时后,用PBS洗涤细胞,并用4%多聚甲醛固定。
随后,细胞用10μg/ml DAPI染色10分钟,并用PBS洗涤。最后,使用激光共聚焦荧光显微镜(Zeiss LSM 710,德国)观察胶束的结合和内化。核的参数设置为λex 405 nm,ICG的参数设置在λex 633 nm。
为了进一步定量分析,将1×105个SGC7901细胞接种在每孔12孔板中,并用含有以下成分的无血清培养基培养DSPE-PEG@ICG和DSPE-PEG-RGD@ICG(等效ICG浓度:1mg/ml)处理12小时。在预定时间,收获细胞并用PBS洗涤。然后,将细胞重新悬浮在PBS中,并立即通过Accuri流式细胞术进行定量分析。
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