产品名称:硫辛酸聚乙二醇活性酯;Lipoic acid-PEG-NHS的纯化与表征
关键反应条件
溶剂选择:
PBS缓冲液(pH 7.0)或DMSO,避免水分导致NHS酯水解。
pH控制:
NHS酯活化步骤需pH 5-6(避免羧基质子化),硫辛酸连接步骤需pH 7.0(促进巯基-马来酰亚胺反应)。
温度与时间:
巯基-马来酰亚胺反应需室温进行,反应时间2-4小时。
反应后需通过透析或凝胶过滤去除未反应试剂。
纯化与表征
纯化方法:
制备型HPLC纯化(C18柱,乙腈/水梯度洗脱),收集主峰产物。
透析(截留分子量1 kDa)去除未反应试剂(适用于低分子量杂质)。
表征方法:
质谱(MS):确认分子量(理论MW≈硫辛酸部分(206 Da)+ PEG部分(如2000 Da)+ NHS部分(115 Da)≈2321 Da)。
NMR:检测硫辛酸的巯基邻位质子(δ 2.5-3.0 ppm)、PEG的亚甲基质子(δ 3.5-3.8 ppm)和NHS的琥珀酰亚胺质子(δ 2.6-2.8 ppm)。
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