产品名称:丹磺酰胺聚乙二醇马来酰亚胺;Dansyl-PEG-MAL的纯化与表征
关键反应条件
溶剂选择:
DMF或DMSO,避免水分导致MAL基团水解。
pH控制:
MAL活化步骤需pH 6.5-7.5(避免马来酰亚胺水解),丹磺酰胺偶联步骤需pH 8.0(促进亲核取代)。
温度与时间:
室温反应2小时(MAL活化),4℃过夜(偶联反应)。
反应后需通过透析或凝胶过滤去除未反应试剂。
纯化与表征
纯化方法:
制备型HPLC纯化(C18柱,乙腈/水梯度洗脱),收集主峰产物。
透析(截留分子量1 kDa)去除未反应试剂(适用于低分子量杂质)。
表征方法:
质谱(MS):确认分子量(理论MW≈丹磺酰胺部分(268 Da)+ PEG部分(如2000 Da)+ MAL部分(111 Da)≈2379 Da)。
NMR:检测丹磺酰胺的芳香质子(δ 7.0-8.5 ppm)、PEG的亚甲基质子(δ 3.5-3.8 ppm)和MAL的乙烯基质子(δ 6.7 ppm)。
荧光光谱:观察丹磺酰胺的激发(λex≈340 nm)和发射(λem≈520 nm)波长。
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