产品名称：ICG-NHS(mono-sulfo-cy7.5 NHS)，吲哚菁绿活性酯的合成方法

合成方法

ICG-NHS（Mono-Sulfo-Cy7.5 NHS）的合成通常涉及以下步骤：

（1）Cy7.5与磺酸基团的引入

方法：

通过化学合成将Cy7.5染料与单磺酸基团连接，形成Mono-Sulfo-Cy7.5。

磺化反应：

在Cy7.5的芳香环或侧链上引入磺酸基团，通常使用浓硫酸或发烟硫酸作为磺化试剂，控制反应条件以避免过度磺化。

纯化：

通过柱色谱或HPLC分离单磺化产物，去除未反应的原料和副产物。

（2）ICG与Mono-Sulfo-Cy7.5的偶联

方法：

将ICG与Mono-Sulfo-Cy7.5通过共价键连接，形成ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5。

反应类型：

酰胺键形成：若ICG或Mono-Sulfo-Cy7.5含有羧基（-COOH），可通过活化酯（如NHS酯）与氨基反应形成酰胺键。

点击化学：利用叠氮化物（-N₃）与炔烃（-C≡CH）的环加成反应，实现高效偶联。

反应条件：

溶剂：无水DMF或DMSO（对于疏水反应），或PBS缓冲液（对于亲水反应）。

温度：室温至40℃，具体取决于反应类型和底物稳定性。

时间：数小时至过夜，需通过TLC或HPLC监测反应进度。

纯化：

通过透析（截留分子量根据产物大小选择）或HPLC去除未反应的小分子和副产物。

（3）NHS活性酯的引入

方法：

将ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5的羧基通过NHS/DCC活化，生成NHS酯。

反应步骤：

将ICG-Mono-Sulfo-Cy7.5溶解在无水DMF中，加入NHS和DCC（二环己基碳二亚胺）。

室温搅拌数小时，使羧基与NHS形成活化酯。

过滤去除生成的DCU（二环己基脲）沉淀，收集滤液。

通过柱色谱或HPLC纯化NHS酯产物。

注意事项：

反应需在无水条件下进行，避免NHS酯水解。

DCC可能引起过敏反应，操作时需佩戴手套和护目镜。

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