ATTO 655-NHS Ester 是一种基于 ATTO 655 荧光染料的活性酯衍生物,用于与生物分子(如蛋白质、体、寡核苷酸、多肽等)中伯胺基团(–NH₂)发生共价偶联。
它属于 远红区荧光染料,具有光学性能,尤其在高端荧光成像、单分子检测、超分辨显微术(如 STED、PALM、STORM)及多重荧光标记等领域占有重要地位。
NHS 酯活性原理
NHS 酯(N-Hydroxysuccinimide ester)是一种高度活泼的酰基转移试剂,能快速与伯胺基团发生反应,形成稳定的酰胺键。这使得 ATTO 655-NHS Ester 能高效标记多种生物分子,如:
蛋白质(体、酶、受体)
多肽(尤其是具有游离 N 端的多肽)
氨基修饰的寡核苷酸(DNA、RNA)
氨基官能化的纳米颗粒(如聚合物、量子点、磁珠等)
应用领域
1. 高分辨率荧光显微术
ATTO 655 是超分辨显微术(如 STED、PALM、STORM)的热门染料之一。它具备高光稳定性、适合 STED 脱激发波长 (~775 nm),使得图像分辨率可突破传统衍射限。
2. 流式细胞术(Flow Cytometry)
远红荧光探针适合用于多重流式分析,与绿色、橙红色等波段荧光探针光谱分离度高,避免信号重叠。
3. 蛋白质/体标记
用于体偶联后,可在免疫荧光染色、ELISA、Western blot 等实验中作为灵敏的检测探针。
4. 核酸标记与分子探针
ATTO 655-NHS 可标记氨基修饰的寡核苷酸,用于 FISH、qPCR 探针、分子检测传感器及核酸折叠研究。
5. 单分子检测(Single Molecule Detection)
ATTO 655 荧光信号强且闪烁效应较小,是单分子成像领域的理想染料,适合追踪单个生物分子运动轨迹。
6. 活体成像(In vivo Imaging)
其远红发射波长减少组织吸收和散射,适合浅层活体成像,尤其在小鼠实验中可用于检测浅表组织信号。
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