CM-DiI，全称为 Chloromethylbenzamido Dialkylcarbocyanine，是一种改良型 DiI 系列细胞膜染料，是现代细胞生物学、神经科学以及组织学中常用的荧光标记工具。CM-DiI 在荧光性能、膜结合能力及固定后保留性能方面，都优于传统 DiI，成为细胞示踪、神经纤维标记以及细胞膜成像的重要工具。其鲜明的橙红色荧光以及较强的光稳定性，使其在荧光显微镜和流式细胞仪等多种平台上具有广泛应用。

常用名 CM-DiI（细胞膜橙红色荧光探针）

英文名 Cell Tracker CM-DiI

CAS号 180854-97-1

分子量 1051.51

分子式 C68H105Cl2N3O

熔点 N/A

化学结构与特点

CM-DiI 属于羧菁（carbocyanine）染料家族，其结构核心包括：

亲脂性烷基链（C_18 或 C_16）：赋予染料强烈的膜亲和力，使其能够牢固插入细胞膜双层。

氯甲基基团（chloromethyl group）：是 CM-DiI 区别于普通 DiI 的关键修饰。氯甲基基团可以与细胞内的巯基或胺基形成共价键，极大增强了染料的保留性，防止染料在固定、透化或长期培养过程中流失。

羧菁核心结构：决定其荧光特性，赋予染料明亮的橙红色荧光。

染色步骤与注意事项

染色流程（悬浮细胞示例）

用 DMSO 配制 CM-DiI 母液（通常浓度 1-5 mM）。

将母液稀释至适用浓度（通常 1-10 μM）。

加入细胞悬液，轻轻混匀。

孵育 5–20 分钟，避光操作。

洗涤细胞，去除游离染料。

观察或进行后续实验。

注意事项

CM-DiI 对光非常敏感，整个操作需在暗处进行。

高浓度可能导致染料聚集，产生自荧光斑点或信号过强。

若用于活体实验，需评估细胞毒性，CM-DiI 在低浓度下一般毒性较低。

染色效果可能与细胞类型、膜脂组成以及实验条件有关，需优化实验参数

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