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AF647 Streptavidin,链霉亲和素Streptavidin的结构与性能
发布时间:2025-07-04     作者:zyl   分享到:

AF647 Streptavidin,全称 Alexa Fluor 647 Streptavidin,是现代分子生物学、细胞生物学以及医学研究中为常用的荧光偶联探针。它结合了链霉亲和素(Streptavidin)超强的生物素结合能力,以及Alexa Fluor 647染料卓越的荧光性能,成为多种检测与成像实验的核心试剂。凭借其高灵敏度、低背景、优异的光稳定性和适合深部组织成像的远红外荧光特性,AF647 Streptavidin 广泛应用于流式细胞术、荧光显微镜、Western blot、ELISA、免疫组织化学及其他生物偶联检测系统。

AF647 Streptavidin 结构与性能

AF647 Streptavidin 是通过将Alexa Fluor 647共价偶联到链霉亲和素蛋白上的荧光探针。制备过程通常采用 NHS 酯化学,将 Alexa Fluor 647 NHS 酯与 Streptavidin 蛋白的赖氨酸残基共价连接,确保染料与蛋白质之间形成稳定的共价键。

其性能特点包括:

与生物素结合能力不受标记影响,结合位点完全保留

高偶联度(通常约每个链霉亲和素四聚体偶联 3~7 个染料分子)

荧光信号强,灵敏度高

在常见缓冲液和实验条件下化学稳定

与各种生物素化合物兼容,包括抗体、寡核苷酸、蛋白质、小分子探针等

AF647 Streptavidin

主要应用领域

1. 流式细胞术(Flow Cytometry)

AF647 Streptavidin 是流式细胞术中检测生物素化抗体或探针的理想选择。其远红荧光避免了与 FITC、PE 等染料的光谱重叠,适合多色检测实验。

2. 荧光显微镜成像

在共聚焦显微镜、超分辨显微镜(如 STED、SIM、PALM/STORM)等高端成像技术中,AF647 Streptavidin 提供高的光稳定性和亮度,适合需要长时间曝光或多次扫描的实验。

3. 免疫组化与免疫荧光染色

用于组织切片染色,结合生物素化一抗或探针,通过 AF647 的远红荧光减少组织自发荧光,提高检测灵敏度,尤其适合厚组织或深层组织成像。

4. ELISA 与 Western blot

AF647 Streptavidin 可作为检测分子,用于识别生物素标记的抗体或探针,实现荧光检测。

5. 核酸杂交实验

结合生物素标记的寡核苷酸探针,实现高灵敏度核酸检测,如 FISH 实验。

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