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Cy3-DPPE在冷Triton处理中的可溶性表征
发布时间:2025-07-09     作者:kx   分享到:

文献:荧光胆固醇类似物在分隔的质膜中的超快扩散

链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/tra.12163

作者:平本山木奈绪, 田中健二, 铃木健一, 广泽晃一郎, 宫原真奈美, 齐亚·卡莱, 田中光一郎, 葛西林氏, 久住明弘, 藤原贵宏

节选:

PM 中 Bdp-Chol 和其他磷脂探针的 Cold-Triton 溶解度

PM分子在冷Triton处理后不溶解,这通常与其在活细胞PM中分配到筏状结构域有关,尽管这从未得到证实(6 7 , 20;已综述于32)。因此,在本研究中,我们检测了Bdp-Chol和其他掺入PM的磷脂探针在冷Triton中的溶解度,并与文献中其他原型筏状和非筏状分子(例如GPI锚定蛋白(例如CD59、Thy1和DAF)和转铁蛋白受体)进行了比较。 HASM 和 COS-7 PM 中掺入了 Bdp-Chol 荧光磷脂探针 [Cy3 结合磷脂酰乙醇胺 (Cy3-PE)],[统称为 Cy3-二油酰-PE、Cy3-二肉豆蔻酰-PE 和 Cy3-二棕榈酰-PE,分别缩写为 Cy3-DOPE、Cy3-DMPE 和 Cy3-DPPE] 或烷基链中结合了 Bodipy FL (Life Technologies) 的 GM1 (Bdpø-GM1),用冷 Triton (1%,2.8°C,15 分钟;图 S1) 萃取。Bdp-Chol 以及内源性神经节苷脂 GM1 和 Cy3 结合霍乱毒素 B 亚基的原型筏相关分子复合物大部分仍留在 DRM 中。相反,所有三种 Cy3-PE 和 Bdpø-GM1 几乎完全溶解;即 Cy3-DMPE、Cy3-DPPE 和 Bdpø-GM1 可溶于冷 Triton,就像原型非筏分子 Cy3-DOPE 一样。Cy5-DMPE 36和 Bdpø-GM1 21以前在没有任何实验数据的情况下被认为是筏相关的,但这里获得的结果表明这些分子不是典型的 DRM 相关分子。目前的结果与 Sezgin 等人获得的数据一致。

Cy3-DPPE

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