AF 555 NHS ester,AF 555 NHS的反应原理
AF555 NHS ester(Alexa Fluor 555 N-羟基琥珀酰亚胺酯)是一种具有高活性的荧光标记试剂,常用于抗体、蛋白质和其他生物分子上的共价荧光标记。其染料部分为Alexa Fluor 555,具有激发波长约为555 nm、发射波长565 nm的明亮橙红色荧光,适合流式细胞术、共聚焦显微镜、多色成像等应用。
其反应原理基于NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester)与伯胺的酰胺化反应。蛋白质中的赖氨酸残基侧链或N-末端的游离氨基,能在适当的pH条件下(通常为pH 7.5~8.5)充当亲核试剂,与AF555-NHS反应,生成稳定的酰胺键。这种共价键在生理条件下具有高度稳定性,不易水解或降解,保证了标记的长期性和可追踪性。
该反应不需要金属离子或有机催化剂,在温和的水性环境下即可进行,且反应速度快,副反应较少。在标记抗体或酶时,控制染料/蛋白比例非常重要,以避免过度标记造成构象改变或功能丧失。标记完成后通常需通过透析、凝胶层析或HPLC等手段去除游离染料,以获得高纯度的荧光偶联产物。
AF555 NHS ester的优势在于其低背景荧光和高度水溶性,特别适用于高灵敏度检测及定量实验。标记产物可用于免疫荧光检测、ELISA、蛋白定位、细胞识别以及纳米载体的功能修饰等多个生物研究领域。
产品名称:AF 555 NHS ester
纯度:95%+
性状:基于不同的分子量,呈白色 / 类白色固体,或液体。
溶剂:溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23