6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯，92557-81-8，6-FAM NHS ester的反应条件

6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（6-FAM NHS ester）是一种常用的绿色荧光染料活性酯，属于荧光素类染料。该化合物激发波长约为495 nm，发射波长为520 nm，发出明亮的绿色荧光，常被用于标记寡核苷酸、蛋白质、抗体和聚合物等生物分子。

其活性基团为NHS酯（N-hydroxysuccinimide ester），可专一性地与分子中的伯胺反应，生成稳定的酰胺键。这种反应通常在无金属离子的条件下，于pH 7.5–8.5的缓冲液中进行，例如碳酸盐缓冲液或HEPES缓冲液。适反应温度为室温，时间控制在30分钟至1小时内即可达到较高结合效率。

反应条件关键要点如下：

溶剂选择：6-FAM NHS ester 对湿气敏感，需溶于无水DMSO或DMF中，并立即加入到含有目标胺基分子的缓冲液中。反应期间避免暴露于高湿环境。

pH控制：在碱性条件下（pH 8.0左右），NHS酯反应为高效，且能避免羧基的自水解。应避免使用Tris等含胺缓冲液，以免与NHS反应竞争。

比例与浓度：推荐使用染料与目标分子的摩尔比为3:1至10:1，以确保完全标记。多余染料可通过HPLC、凝胶过滤等方式移除。

避光反应：为防止荧光素光漂白，反应应在避光条件下进行。

6-FAM NHS ester 所标记的分子在各种荧光检测平台上具有高灵敏度表现，常用于RT-PCR、FISH探针构建、蛋白质电泳、胞内定位实验等，是绿色荧光通道中的经典染料之一。

中文名称： 6-羧基荧光素琥珀酰亚胺醚

MF： C25H15NO9

MW： 473.39

CAS： 92557-81-8

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23