产品名称:Poly-lysines-PEG-RGD的合成方法
合成方法
Poly-lysines-PEG-RGD 的合成通常分为两步:
(1) 多聚赖氨酸-PEG的制备
方法:
酰胺键形成:
若多聚赖氨酸端基为羧酸(Poly-Lys-COOH),可通过EDC/NHS活化后与PEG-NH₂反应,生成Poly-Lys-PEG-NH₂。
反应条件:pH 4.5-5.5,室温,反应时间2-4小时。
点击化学:
若多聚赖氨酸含炔烃(Poly-Lys-C≡CH),可与PEG-Azide(叠氮基)通过CuAAC反应(铜催化叠氮-炔烃环加成)连接,生成Poly-Lys-PEG-Azide,随后通过还原反应引入氨基(-NH₂)或羧酸(-COOH)。
(2) RGD肽的引入
方法:
巯基-马来酰亚胺反应:
若RGD肽含有半胱氨酸(Cys),其巯基(-SH)可与PEG末端的马来酰亚胺基团反应,生成Poly-Lys-PEG-RGD。
反应条件:pH 6.5-7.5,室温,反应时间1-2小时。
氨基-NHS酯反应:
若RGD肽含有赖氨酸(Lys)或N端氨基(-NH₂),可与PEG末端的NHS酯反应,生成Poly-Lys-PEG-RGD。
反应条件:pH 8.0-9.0,室温,反应时间2-4小时。
纯化:
通过透析(截留分子量10,000 Da)、凝胶色谱(如Sephadex G-50)或HPLC去除未反应的小分子和副产物。
最终产物需通过质谱(MS)或核磁共振(NMR)确认结构。
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