FITC-Transferrin
FITC-Transferrin(荧光素标记转铁蛋白)——细胞内吞与靶向传输示踪探针
一、产品简介
FITC-Transferrin是一种将转铁蛋白(Transferrin,Tf)通过荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价标记制备而成的生物标记试剂。转铁蛋白是一种铁离子结合蛋白,主要负责将铁离子转运到细胞内,参与细胞的铁代谢和生理调控。通过FITC标记后,转铁蛋白获得绿色荧光信号,能够被广泛用于细胞摄取研究、受体介导内吞、细胞表面受体定位和靶向药物递送等生物医学领域的研究。
二、转铁蛋白(Transferrin)基础知识
结构与功能:转铁蛋白是一种约80 kDa的糖蛋白,具有两个铁结合位点,可与Fe³⁺高亲和力结合。转铁蛋白通过与细胞表面转铁蛋白受体(TfR)结合,介导铁的摄取和转运。
生物学意义:
参与铁稳态调节,保证细胞对铁的需求;
由于肿瘤细胞和快速增殖细胞通常高表达TfR,转铁蛋白成为靶向递送的理想载体;
在药物输送、细胞标记及诊断成像中有广泛应用。
三、FITC标记原理及制备
标记机理:FITC含有活性的异硫氰酸酯基团(–N=C=S),能与转铁蛋白中的赖氨酸残基氨基(–NH₂)形成稳定的共价硫脲键。
制备过程:
将转铁蛋白溶解在适宜pH缓冲液中(通常pH 8.0-9.0);
在缓冲液中缓慢加入FITC,反应一定时间以实现有效标记;
通过透析或凝胶过滤除去未结合的游离FITC,纯化得到FITC-Transferrin;
标记效率:控制在保证蛋白活性的前提下,获得适合实验要求的荧光强度。
四、产品理化性质
性质 说明
分子量 约80 kDa
外观 绿色透明液体或冻干粉
荧光激发/发射波长 激发约495 nm,发射约520 nm(绿色荧光)
溶解性 易溶于PBS、生理盐水及常规缓冲液
稳定性 避光保存于4°C,荧光稳定性良好
生物活性 保持对转铁蛋白受体的高亲和力
五、产品性能与特点
1. 保持高亲和力受体结合特性
FITC标记过程中保证转铁蛋白三维结构及活性,标记后仍能有效与转铁蛋白受体结合,模拟自然受体介导的内吞过程。
2. 明亮、稳定的绿色荧光信号
FITC分子发射出明亮绿色荧光,便于使用荧光显微镜、流式细胞仪等多种检测设备实现高灵敏度检测。
3. 优异的生物相容性与低细胞毒性
适用于活细胞实验,且对细胞无明显毒副作用,适合多种细胞系和体外应用。
4. 多领域应用广泛
涵盖细胞生物学、药物递送、纳米载体靶向、受体表达分析及生物医学成像等。
六、主要应用
1. 细胞摄取及受体介导内吞研究
研究细胞摄取转铁蛋白的机制及动力学;
探索不同细胞类型中转铁蛋白受体表达水平及功能。
2. 受体靶向药物及纳米载体研究
作为靶向分子修饰纳米粒子表面,实现在细胞中的高效递送;
监测药物载体的细胞摄取和分布。
3. 细胞标记及流式细胞分析
用于分析细胞表面转铁蛋白受体的表达和分布;
结合多重染色实现细胞表型鉴定和功能分析。
4. 荧光显微成像
观察转铁蛋白及其受体在细胞及组织中的定位;
辅助疾病机制的研究,如肿瘤、神经退行性疾病和铁代谢异常。
七、使用方法与操作建议
1. 配制和保存
冻干粉或液体形式产品在使用前用PBS或相应缓冲液复溶;
建议浓度为0.1-1 mg/mL,根据实验需求调整;
避光保存,4°C冷藏,避免反复冻融。
2. 实验条件优化
推荐使用浓度范围0.1-20 μg/mL,孵育时间30分钟至1小时;
室温或4°C孵育均可,视实验设计灵活调整;
孵育后多次用缓冲液洗涤,减少非特异性结合。
3. 注意事项
避免荧光淬灭,实验及存储中应避免强光照射;
标记可能对蛋白部分活性产生影响,建议实验前验证结合能力;
流式细胞术实验中设置阴性对照,保证数据准确。
八、质量控制
项目 标准指标
纯度 ≥95%
荧光强度 激发495 nm,发射520 nm,信号稳定
受体结合活性 ≥90%保持天然转铁蛋白受体结合能力
分子完整性 SDS-PAGE检测,确认无降解
细胞相容性 细胞存活率≥90%
九、包装规格
规格 包装形式 储存条件
0.5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
1 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存
十、常见问题
Q1:FITC-Transferrin的激发和发射波长是多少?
A:激发波长约495 nm,发射波长约520 nm,呈明亮绿色荧光。
Q2:该产品适合用于活细胞染色吗?
A:是的,FITC-Transferrin适合活细胞摄取及受体研究,建议先测试细胞毒性。
Q3:如何防止荧光信号衰减?
A:避免强光照射,使用漂白剂,实验及存储时避光处理。
十一、总结
FITC-Transferrin结合了转铁蛋白天然的生物功能和FITC优异的荧光性能,是细胞生物学及药物输送领域的重要工具。其保持了转铁蛋白的高亲和力和受体结合活性,能够有效用于细胞摄取、受体定位及药物靶向研究,助力生命科学研究和精准医学发展。
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厂家:西安齐岳生物科技有限公司
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
产地:西安
温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!
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