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FITC-Transferrin,荧光素标记转铁蛋白,——细胞内吞与靶向传输示踪探针
发布时间:2025-07-21     作者:ssl   分享到:

FITC-Transferrin

FITC-Transferrin(荧光素标记转铁蛋白)——细胞内吞与靶向传输示踪探针

一、产品简介

FITC-Transferrin是一种将转铁蛋白(Transferrin,Tf)通过荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价标记制备而成的生物标记试剂。转铁蛋白是一种铁离子结合蛋白,主要负责将铁离子转运到细胞内,参与细胞的铁代谢和生理调控。通过FITC标记后,转铁蛋白获得绿色荧光信号,能够被广泛用于细胞摄取研究、受体介导内吞、细胞表面受体定位和靶向药物递送等生物医学领域的研究。

二、转铁蛋白(Transferrin)基础知识

结构与功能:转铁蛋白是一种约80 kDa的糖蛋白,具有两个铁结合位点,可与Fe³⁺高亲和力结合。转铁蛋白通过与细胞表面转铁蛋白受体(TfR)结合,介导铁的摄取和转运。

生物学意义:

参与铁稳态调节,保证细胞对铁的需求;

由于肿瘤细胞和快速增殖细胞通常高表达TfR,转铁蛋白成为靶向递送的理想载体;

在药物输送、细胞标记及诊断成像中有广泛应用。

三、FITC标记原理及制备

标记机理:FITC含有活性的异硫氰酸酯基团(–N=C=S),能与转铁蛋白中的赖氨酸残基氨基(–NH₂)形成稳定的共价硫脲键。

制备过程:

将转铁蛋白溶解在适宜pH缓冲液中(通常pH 8.0-9.0);

在缓冲液中缓慢加入FITC,反应一定时间以实现有效标记;

通过透析或凝胶过滤除去未结合的游离FITC,纯化得到FITC-Transferrin;

标记效率:控制在保证蛋白活性的前提下,获得适合实验要求的荧光强度。

四、产品理化性质

性质 说明

分子量 约80 kDa

外观 绿色透明液体或冻干粉

荧光激发/发射波长 激发约495 nm,发射约520 nm(绿色荧光)

溶解性 易溶于PBS、生理盐水及常规缓冲液

稳定性 避光保存于4°C,荧光稳定性良好

生物活性 保持对转铁蛋白受体的高亲和力

FITC-Transferrin,荧光素标记转铁蛋白

五、产品性能与特点

1. 保持高亲和力受体结合特性

FITC标记过程中保证转铁蛋白三维结构及活性,标记后仍能有效与转铁蛋白受体结合,模拟自然受体介导的内吞过程。

2. 明亮、稳定的绿色荧光信号

FITC分子发射出明亮绿色荧光,便于使用荧光显微镜、流式细胞仪等多种检测设备实现高灵敏度检测。

3. 优异的生物相容性与低细胞毒性

适用于活细胞实验,且对细胞无明显毒副作用,适合多种细胞系和体外应用。

4. 多领域应用广泛

涵盖细胞生物学、药物递送、纳米载体靶向、受体表达分析及生物医学成像等。

六、主要应用

1. 细胞摄取及受体介导内吞研究

研究细胞摄取转铁蛋白的机制及动力学;

探索不同细胞类型中转铁蛋白受体表达水平及功能。

2. 受体靶向药物及纳米载体研究

作为靶向分子修饰纳米粒子表面,实现在细胞中的高效递送;

监测药物载体的细胞摄取和分布。

3. 细胞标记及流式细胞分析

用于分析细胞表面转铁蛋白受体的表达和分布;

结合多重染色实现细胞表型鉴定和功能分析。

4. 荧光显微成像

观察转铁蛋白及其受体在细胞及组织中的定位;

辅助疾病机制的研究,如肿瘤、神经退行性疾病和铁代谢异常。

七、使用方法与操作建议

1. 配制和保存

冻干粉或液体形式产品在使用前用PBS或相应缓冲液复溶;

建议浓度为0.1-1 mg/mL,根据实验需求调整;

避光保存,4°C冷藏,避免反复冻融。

2. 实验条件优化

推荐使用浓度范围0.1-20 μg/mL,孵育时间30分钟至1小时;

室温或4°C孵育均可,视实验设计灵活调整;

孵育后多次用缓冲液洗涤,减少非特异性结合。

3. 注意事项

避免荧光淬灭,实验及存储中应避免强光照射;

标记可能对蛋白部分活性产生影响,建议实验前验证结合能力;

流式细胞术实验中设置阴性对照,保证数据准确。

八、质量控制

项目 标准指标

纯度 ≥95%

荧光强度 激发495 nm,发射520 nm,信号稳定

受体结合活性 ≥90%保持天然转铁蛋白受体结合能力

分子完整性 SDS-PAGE检测,确认无降解

细胞相容性 细胞存活率≥90%

九、包装规格

规格 包装形式 储存条件

0.5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

1 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

5 mg 冻干粉 –20°C 避光保存

十、常见问题

Q1:FITC-Transferrin的激发和发射波长是多少?

A:激发波长约495 nm,发射波长约520 nm,呈明亮绿色荧光。

Q2:该产品适合用于活细胞染色吗?

A:是的,FITC-Transferrin适合活细胞摄取及受体研究,建议先测试细胞毒性。

Q3:如何防止荧光信号衰减?

A:避免强光照射,使用漂白剂,实验及存储时避光处理。

十一、总结

FITC-Transferrin结合了转铁蛋白天然的生物功能和FITC优异的荧光性能,是细胞生物学及药物输送领域的重要工具。其保持了转铁蛋白的高亲和力和受体结合活性,能够有效用于细胞摄取、受体定位及药物靶向研究,助力生命科学研究和精准医学发展。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!

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