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FITC标记低分子透明质酸——绿色荧光多糖用于细胞摄取与分布分析
发布时间:2025-07-21     作者:ssl   分享到:

FITC-透明质酸3k

FITC标记低分子透明质酸(HA,MW 3 kDa)——绿色荧光多糖用于细胞摄取与分布分析

一、产品简介

FITC-透明质酸3k是一种将荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价标记于低分子量透明质酸(分子量约3,000道尔顿)上的荧光标记多糖。透明质酸(HA)作为人体内重要的天然多糖,广泛分布于结缔组织、皮肤、关节液及眼睛等组织。低分子量HA由于其独特的生物学功能和良好的生物相容性,在细胞信号传导、药物递送及生物成像等领域发挥重要作用。通过FITC标记,使其具备绿色荧光性能,便于在细胞及体内的追踪和定位研究。

二、透明质酸简介

分子结构

透明质酸是由重复的二糖单元—β-D-葡萄糖醛酸和β-D-乙酰氨基葡萄糖通过β-1,3和β-1,4糖苷键连接而成的线性多糖。其分子量范围广泛,从几千至数百万Da,分子量大小直接影响其物理化学性质和生物学功能。

低分子量HA特点

3kDa的低分子量HA分子短小,能够穿透细胞膜,促进细胞信号传导,调节细胞行为,同时具备较快的代谢和生物降解速度。

生物学功能

促进细胞迁移和增殖

参与组织修复和再生

作为细胞表面受体(如CD44、RHAMM)的配体,调节细胞-基质相互作用

低分子HA在炎症反应、肿瘤转移及免疫调节中具有重要作用

三、FITC标记原理及制备

标记机理

FITC的异硫氰酸酯基团(–N=C=S)与透明质酸分子中经过活化的氨基或羧基(通常通过EDC/NHS化学偶联)形成稳定的共价键,从而将荧光素共价结合在HA分子链上。

制备步骤

HA活化:使用EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)激活HA上的羧基,形成活性中间体;

FITC偶联:将FITC溶解于适宜溶剂(如DMSO),缓慢加入活化HA溶液,反应于适温避光条件下进行数小时;

纯化处理:通过透析或超滤除去未反应的FITC及杂质,获得纯净的FITC-HA3k;

冻干保存:后冷冻干燥制备冻干粉,便于长期储存和使用。

标记度调控

通过调整FITC与HA的摩尔比、反应时间及pH值,实现不同标记度,满足不同实验需求。

FITC标记低分子透明质酸

四、理化性质

性质 说明

分子量 约3,000 Da

外观 绿色荧光透明液体或冻干粉

荧光特性 激发波长495 nm,发射波长520 nm

溶解性 良好溶于水及生理缓冲液

稳定性 避光、4°C冷藏保存,荧光强度稳定

生物相容性 良好,低细胞毒性

标记度 根据需求调节,一般低于5%

五、产品特点

1. 低分子量优势

低分子量(3kDa)使FITC-HA具有更好的穿透力和生物活性,适合细胞内信号研究和快速代谢过程跟踪。

2. 明亮稳定的荧光性能

FITC赋予HA稳定且强烈的绿色荧光,便于荧光显微镜、流式细胞仪及体内成像应用。

3. 保留透明质酸生物学功能

温和标记工艺确保HA分子结构和生物活性不受损,保持对细胞受体的高亲和力。

4. 优良水溶性与生物相容性

高纯度、无菌处理,适合细胞培养及体内实验。

六、主要应用领域

1. 细胞摄取及受体结合研究

追踪低分子HA在细胞内的摄取过程及代谢路径;

研究HA与CD44等受体的结合动力学与调控机制。

2. 荧光成像与细胞标记

用于荧光显微成像,观察HA在细胞和组织中的分布与动态变化;

用于流式细胞术定量分析细胞摄取HA的效率。

3. 药物递送系统

低分子HA作为药物载体的标记,追踪其递送和释放过程,评估载体性能;

开发靶向纳米载体,改善药物疗效。

4. 组织工程与再生医学

监测HA基生物材料的降解与细胞相互作用,辅助组织修复研究。

七、使用方法与操作指南

1. 复溶与保存

冻干粉用无菌PBS或纯水轻轻溶解,建议浓度0.1–5 mg/mL;

避光保存于4°C,避免冻融循环以保护荧光性能。

2. 实验操作

细胞实验建议避光孵育,浓度和时间根据细胞类型调整,通常30分钟至1小时;

使用后充分洗涤以去除非结合的标记物,减少背景干扰。

3. 注意事项

标记度较高可能影响HA活性,建议优化使用浓度;

配置新鲜溶液,避免长时间光照导致荧光淬灭。

八、质量控制标准

检测项目 标准指标

外观 绿色透明液体或冻干粉

纯度 ≥95%

荧光性能 激发495 nm,发射520 nm,信号稳定

分子量 约3,000 Da

生物活性 保持对CD44受体结合能力

毒性检测 细胞存活率≥90%

九、包装规格

规格 包装形式 储存条件

1 mg 冻干粉 4°C 避光保存

5 mg 冻干粉 4°C 避光保存

10 mg 冻干粉 4°C 避光保存

十、常见问题解答

Q1:FITC-HA3k的激发和发射波长是多少?

A:激发波长约495 nm,发射波长约520 nm,发出明亮绿色荧光。

Q2:低分子量HA与高分子量HA的区别?

A:低分子HA分子量小,易穿透细胞膜,活性更强,代谢快;高分子HA主要作用于细胞外基质,稳定性更强。

Q3:产品适合用于活细胞荧光成像吗?

A:适合,低细胞毒性且荧光稳定,适合细胞内摄取和信号传导研究。

十一、总结

FITC-透明质酸3k结合了低分子量HA的良好生物活性和FITC的高效荧光标记性能,是细胞生物学、药物递送和生物成像领域的理想工具。其优异的水溶性、低毒性和稳定的荧光信号,为研究HA相关生命过程及开发新型纳米药物载体提供了有力支持。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务,覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料,满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制,灵活设计标记方案,快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研,不能用于人体实验!

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