FITC异硫氰酸荧光素

FITC（异硫氰酸荧光素）——经典绿色荧光标记试剂用于氨基修饰生物分子

一、产品简介

FITC（Fluorescein Isothiocyanate）是一种广泛使用的绿色荧光染料，分子式C21H11NO5S，分子量389.4。其结构中含有异硫氰酸酯（–N=C=S）活性基团，能够与蛋白质、肽链以及多种含有氨基的分子形成稳定的共价键，因而广泛用于生物标记和免疫检测领域。

FITC具有较高的荧光量子产率和良好的光稳定性，激发波长约495 nm，发射波长约520 nm，呈鲜明的绿色荧光，是免疫荧光染色、细胞追踪、分子成像等科研领域的经典工具。

二、化学性质与结构

化学结构

FITC包含荧光素基团和异硫氰酸酯活性基团。异硫氰酸酯基团能与蛋白质或其他生物分子上的游离氨基（如赖氨酸侧链）共价结合。

分子量389.4 Da

分子式C21H11NO5S

溶解性

FITC易溶于有机溶剂如DMSO、DMF，微溶于水，通常需先溶于有机溶剂后稀释于水或缓冲液中。

稳定性

对光敏感，强光下易发生光漂白，建议避光保存和使用。

三、荧光性质

性质 参数

激发波长 495 nm

发射波长 520 nm

荧光颜色 绿色

荧光量子产率 约0.9

光稳定性 良好，需避免强光直射

FITC的荧光信号明亮，适合多种荧光显微镜、流式细胞仪和荧光板检测设备使用。

四、标记原理与应用

标记原理

FITC的异硫氰酸酯基团能与含有游离氨基的分子（蛋白质、肽、多肽、胺类化合物）发生亲核加成反应，形成稳定的硫代脲共价键。该反应通常在碱性缓冲液（pH 8.0-9.0）中进行，以促进氨基的活性。

标记流程简述

溶解FITC于适宜有机溶剂；

将待标记的蛋白或分子溶解于碱性缓冲液中；

缓慢加入FITC溶液，温和搅拌反应一定时间（通常1-4小时）；

通过透析、凝胶过滤或层析法去除游离FITC，获得纯净标记产物。

应用范围

免疫荧光染色：标记体，实现特异性检测细胞或组织中的目标原；

细胞追踪：标记细胞或细胞组分，观察细胞动态、迁移和定位；

分子相互作用研究：标记蛋白质或核酸，分析结合动力学；

荧光成像：活细胞成像、组织切片观察、体内成像等。

五、产品特点

1. 高效稳定的荧光性能

FITC具有高荧光量子效率和明亮的绿色荧光，适合多种荧光检测仪器。

2. 反应特异性强

异硫氰酸酯基团对游离氨基选择性高，标记效率高，结合稳定。

3. 兼容多种生物分子

广泛适用于蛋白质、多肽、氨基修饰的多糖等生物大分子标记。

4. 易于操作

标记条件温和，无需复杂催化剂，适合常规实验室操作。

六、使用方法与注意事项

1. 溶解与储存

溶于DMSO或DMF制备高浓度储备液，避免水中长期存放以防水解；

储存于-20℃避光密封，防止光降解。

2. 标记反应

反应缓冲常用碳酸盐缓冲液（pH 8.5-9.0）；

控制FITC与待标记物摩尔比，避免过量导致蛋白质变性；

反应时间1-4小时，室温或4℃进行。

3. 纯化与检测

反应后需通过透析或柱层析去除未结合FITC；

标记产物可通过紫外-可见光谱、荧光光谱及SDS-PAGE（结合荧光扫描）检测。

4. 注意事项

避光操作，避免荧光淬灭；

反应pH过高或FITC过量可能影响生物活性；

FITC在水溶液中稳定性有限，建议新鲜配制使用。

七、安全性与环保

FITC有一定的光敏性和毒性，操作时应避免吸入粉尘和皮肤接触；

使用时佩戴手套、护目镜，操作环境通风良好；

废弃物按化学品管理规范处理。

八、质量控制标准

检测项目 标准指标

外观 黄色至橙黄色结晶性粉末

纯度 ≥95%

荧光特性 激发495 nm，发射520 nm

水分含量 ≤1%

熔点 240-244 ℃

九、包装规格与储存

规格 包装形式 储存条件

5 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

25 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

100 mg 玻璃瓶密封 -20℃避光保存

十、常见问题解答

Q1：FITC标记是否会影响蛋白质活性？

A：过量标记可能导致蛋白质构象改变和活性降低，建议优化FITC与蛋白比例。

Q2：如何延长FITC标记物的荧光稳定性？

A：避光保存，使用淬灭剂，尽量避免高温和强光暴露。

Q3：FITC适合标记哪些分子？

A：主要标记含有游离氨基的蛋白质、多肽及氨基化修饰的多糖。

十一、总结

FITC（异硫氰酸荧光素）因其优异的荧光性能和化学反应活性，成为生命科学领域中经典、广泛应用的荧光标记试剂。无论是免疫荧光检测、细胞追踪还是分子相互作用研究，FITC均能提供稳定且高灵敏度的荧光信号，帮助科研人员获得精准的实验数据和丰富的生物学信息。

西安齐岳生物专业提供各类荧光标记产品及定制服务，覆盖小分子药物、蛋白质、多肽、核酸等多种生物分子。我们采用FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor等多种主流荧光染料，满足科研和产业在分子成像、药物追踪、机制研究等领域的需求。

西安齐岳生物确保标记分子高效、稳定且保留生物活性。我们支持个性化定制，灵活设计标记方案，快速响应客户需求。

厂家:西安齐岳生物科技有限公司

用途:科研

状态：固体/粉末/溶液

产地:西安

温馨提醒:仅供科研，不能用于人体实验!

相关产品：

glucan-PEI25K-FITC

glucan-席夫碱-PEI25K-FITC

mPEG-FITC MW：10K

Poly-L-lysine–FITC MW:150,000-300,000

Hyaluronate-Fluorescein,HA-FITC 绿色荧光标记透明质酸（30-50k）

定制FITC-HA（2000k）

FITC-透明质酸钠

FITC-乳糖