HA-DBCO-FITC，异硫氰酸荧光素-二苯环辛炔-透明质酸，FITC-DBCO-HA的纯化与表征

HA-DBCO-FITC是一种基于透明质酸（HA）骨架，通过共价接枝DBCO（Dibenzocyclooctyne）和FITC（Fluorescein isothiocyanate）构建的双功能高分子探针，兼具生物正交点击反应活性与荧光成像能力。该材料的制备通常采用顺序修饰策略，首先通过HA与DBCO-NHS（N-羟基琥珀酰亚胺酯）反应，在中性pH条件下通过HA主链上的羟基或羧基部分与DBCO形成酰胺键或酯键。随后再以FITC标记，利用FITC异硫氰酸基团与残余的氨基反应形成稳定的硫脲键。反应体系一般在避光条件下进行，以避免FITC光漂白。

纯化过程主要包括透析与凝胶层析。首先采用分子量截断为10–30 kDa的透析袋去除游离FITC和DBCO小分子，持续透析48小时以上，并多次更换去离子水以提高清除效率。进一步可通过凝胶过滤层析（如使用Sephadex G-50或G-100）进一步分离未反应小分子及多种产物组分。

表征方面，可使用紫外-可见光谱（UV-Vis）检测FITC的特征吸收峰（约495 nm）和HA的吸收背景，确认FITC标记成功。傅里叶变换红外光谱（FTIR）可验证DBCO的芳香环和炔键特征峰，典型吸收位于2100 cm⁻¹。核磁共振氢谱（¹H NMR）可用于定量分析DBCO与FITC在HA骨架上的修饰程度。此外，荧光光谱、GPC（凝胶渗透色谱）和Zeta电位分析可进一步表征其分子量分布和胶体稳定性。综合表征证实HA-DBCO-FITC是一种适用于荧光成像及生物正交标记的多功能材料。

产品名称：HA-DBCO-FITC，异硫氰酸荧光素-二苯环辛炔-透明质酸

纯度：95%+

性状：基于不同的分子量，呈白色 / 类白色固体，或液体。

溶剂：溶于二氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23