产品名称：CY5-Ponicidin，CY5-冬凌草乙素的合成方法

合成方法

1. 冬凌草乙素的化学修饰

酚羟基保护：

反应：冬凌草乙素 + 三甲基硅烷（TMS-Cl） → TMS保护的冬凌草乙素（防止后续反应中酚羟基干扰）。

条件：二氯甲烷（DCM）为溶剂，三乙胺（TEA）为碱，室温反应2小时，产率＞90%。

氨基引入（可选）：

反应：TMS-Ponicidin + 对硝基苯基氯甲酸酯（PNC） → 活性酯中间体 → 与乙二胺反应 → 引入氨基。

条件：DMF为溶剂，40℃反应12小时，产率约65%。

硫醇基团引入（迈克尔加成前体）：

反应：冬凌草乙素 + 巯基乙酸（TGA） → 硫醇修饰的冬凌草乙素（通过酯键或醚键连接）。

条件：DCC/DMAP催化，室温反应6小时，产率约70%。

2. CY5与冬凌草乙素的偶联

羧酸-氨基偶联（酰胺键）：

反应：CY5-COOH + H₂N-Ponicidin → CY5-CO-NH-Ponicidin（EDC/NHS活化）。

条件：pH 7.0-7.5，室温反应6小时，纯化后产率约75-85%。

酚羟基偶联（硫醚键）：

反应：CY5-NCS + Ponicidin（酚羟基） → CY5-S-Ponicidin（无催化剂，DMSO中反应）。

条件：室温避光反应24小时，产率约60-70%。

迈克尔加成（硫醚键）：

反应：CY5-SH + Ponicidin（α,β-不饱和酮基） → CY5-S-Ponicidin（无催化剂，PBS缓冲液中反应）。

条件：pH 7.4，37℃反应12小时，产率约50-60%。

纯化方法：

高效液相色谱（HPLC）：C18柱，流动相为乙腈-水（含0.1% TFA），梯度洗脱，纯度＞95%。

凝胶渗透色谱（GPC）：去除未反应的CY5或冬凌草乙素，适用于大规模制备。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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