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Cy5.5标记α1微球蛋白,Cy5.5-α1-microglobulin的结构合成
发布时间:2025-08-07     作者:axc   分享到:

Cy5.5标记α1微球蛋白,Cy5.5-α1-microglobulin的结构合成

α1-微球蛋白(α1-microglobulin,α1-MG)是一种分子量约26-33 kDa的小型血浆蛋白,属于脂溶性蛋白家族,具有和解功能。Cy5.5标记α1-微球蛋白的结构合成主要围绕将高灵敏度近红外荧光染料Cy5.5与α1-微球蛋白分子上的可反应官能团实现共价偶联,形成具有荧光追踪能力的功能蛋白。

蛋白结构特点

α1-微球蛋白结构稳定,含有丰富的赖氨酸残基及N端自由氨基,提供了多种可用于化学修饰的亲核反应位点。其三级结构由β折叠构成,具备良好的水溶性和生物活性,偶联过程中需避免破坏其活性构象。

Cy5.5染料结构与活性

Cy5.5染料通常以NHS酯形式存在(Cy5.5-NHS酯),活化羧基使其能与蛋白的自由氨基形成稳定的酰胺键。该标记形式反应高效、条件温和,适合生物大分子修饰。

结构合成原理与步骤

溶液配置:

α1-微球蛋白溶于适宜pH(一般为8.0-8.5)缓冲液(如碳酸盐缓冲液或PBS),确保蛋白质结构稳定且氨基处于游离状态。

染料活化与加入:

Cy5.5-NHS酯溶解于无水DMSO中,随后缓慢加入蛋白溶液,确保均匀分布并避免染料聚集。

共价偶联反应:

利用蛋白表面赖氨酸侧链的ε-氨基作为亲核试剂,进攻Cy5.5-NHS酯的酰基碳,释放NHS基团,形成稳定的酰胺键,实现荧光基团与蛋白的共价结合。反应温和进行(室温或4℃),时间一般2-4小时。

偶联比例控制:

为避免过度标记导致蛋白结构破坏或功能丧失,通常控制Cy5.5与蛋白的摩尔比在1:1至5:1范围,兼顾标记效率与生物活性。

结构稳定性维护:

反应过程避免强酸强碱、高温及有机溶剂过度存在,保护蛋白构象,防止变性。

偶联产物的构象分析:

通过圆二色谱(CD)谱分析确认蛋白二级结构变化,确保偶联未影响蛋白构象。

分子结构特点

Cy5.5标记的α1-微球蛋白整体保持蛋白的三级结构,荧光基团通过柔性连接臂连接在赖氨酸侧链上,确保染料与蛋白相互作用减少空间阻碍,保留蛋白活性。标记后蛋白整体亲水性良好,便于后续生物应用。

产品名称:Cy5.5标记α1微球蛋白,Cy5.5-α1-microglobulin

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物

Cy5.5-α1-microglobulin

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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