Cy5.5-phosphoramidite，CY5.5标记亚磷酰胺的反应步骤

Cy5.5-Phosphoramidite是一种基于近红外荧光染料Cy5.5的亚磷酰胺衍生物，主要用于核酸合成中引入荧光标签，便于荧光检测与分子追踪。亚磷酰胺化学作为固相寡核苷酸合成的核心步骤，涉及具有高反应活性的亚磷酰胺基团与核苷酸的羟基反应，形成磷酸酯键。将Cy5.5染料修饰于亚磷酰胺骨架，可实现荧光功能的核酸合成标记。

反应体系与底物

Cy5.5-Phosphoramidite常用于固相合成系统，其反应对象为游离5'-羟基的核苷酸或修饰核酸。合成一般在惰性气氛（如氮气或氩气）中进行，防止亚磷酰胺基团被水分水解。

反应溶剂与条件

反应多在无水有机溶剂中进行，如无水的二氯甲烷（DCM）、乙腈（ACN）或二甲基甲酰胺（DMF）。保持反应体系极度干燥，避免水分导致的亚磷酰胺水解，降低产率。温度通常控制在室温（20–25℃），以保证亚磷酰胺的活性和核苷酸的稳定性。

反应步骤

将Cy5.5-Phosphoramidite与5'-羟基的核苷酸固相支持物接触，在催化剂（如四乙基胺盐或二苯基磷酰氯）辅助下，亚磷酰胺基团活化并与羟基发生亲核加成反应，生成磷酸三酯键。

反应时间一般为1-3分钟，快速且高效，确保链延伸的准确性。

反应完成后，加入氧化剂（如碘溶液）氧化磷酸三酯成更稳定的磷酸酯结构。

反应控制要点

无水环境：反应中任何水分均可导致亚磷酰胺水解，产生副产物，降低合成效率。

催化剂和氧化剂的选择：保证反应选择性和产物稳定性，催化剂用量需精确控制。

反应时间与温度：控制合成周期，避免染料或核酸降解。

纯化处理：合成后采用高效液相色谱（HPLC）纯化，去除未反应物和副产物。

光学与化学稳定性

产品名称：Cy5.5-phosphoramidite，CY5.5标记亚磷酰胺

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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