产品名称:Cy3.5 DiAcid(tetra SO3)的操作要点与注意事项
1. 应用场景
Cy3.5 DiAcid(tetra SO₃)凭借其高水溶性和双反应位点,适用于以下场景:
蛋白/抗体标记:通过羧酸基活化后与赖氨酸(Lys)的氨基反应,标记抗体、酶、受体蛋白等,用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot等。
核酸标记:通过羧酸基活化后与5'-氨基修饰的寡核苷酸反应,用于荧光原位杂交(FISH)、实时定量PCR或核酸-蛋白互作研究。
体内浅层组织成像:标记后的分子(如荧光探针)可用于细胞、组织切片的高分辨率成像,因发射波长在可见光-近红外过渡区,适合皮肤、黏膜等浅层组织观察。
2. 操作要点与注意事项
羧酸基活化:
使用EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)共同活化羧酸基,生成NHS酯(活性更高,反应更高效)。
活化条件:pH 4.5-6.0(弱酸性),室温(20-25℃),反应时间10-30分钟。
偶联反应:
活化后的Cy3.5 DiAcid(tetra SO₃)(含NHS酯)与含氨基的生物分子混合,pH调整至7.0-8.5(弱碱性),促进氨基对活性酯的亲核进攻,生成稳定的酰胺键。
反应时间:通常1-4小时(浓度高时缩短,低浓度时延长);温度:室温或37℃(加速反应,但需避免染料降解)。
纯化步骤:反应后需通过透析、凝胶过滤(如Sephadex G-25)或超滤去除未反应的染料、活化剂(EDC/NHS)及副产物(如脲),避免背景干扰。
储存条件:-20℃避光保存(干燥环境,避免反复冻融)。磺酸基和羧酸基均对水分敏感,开瓶后需充氮气密封保存。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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