产品名称:FITC-Sucrose,异硫氰酸酯荧光素-蔗糖的合成方法
一、光谱特性
吸收波长(Ex):约495 nm
发射波长(Em):约520 nm
荧光特性:绿色荧光,具有较高的荧光量子产率和光稳定性,适用于荧光显微镜等检测设备。
二、合成方法
原料准备:
蔗糖:作为基础分子,提供羟基反应位点。
FITC:异硫氰酸荧光素,提供荧光标记。
反应条件:
活化FITC:将FITC溶解在碱性溶液中,并加入活化剂以提高活化效率。
偶联反应:在适当的pH条件下(如0.1 M碳酸氢钠缓冲液,pH 8.5),将活化后的FITC与蔗糖分子进行偶联,通常在避光条件下4℃或室温搅拌反应12–24小时。
纯化步骤:
透析法:使用分子量截断在1–3 kDa的透析袋在去离子水中透析48小时以上,期间多次换水。
凝胶层析:如Sephadex G-25,基于分子大小分离荧光蔗糖与游离染料。
反相高效液相色谱(RP-HPLC):用于高精度纯度分离及后续分析。
离心超滤:利用超滤管在一定分子量分级条件下去除小分子游离FITC。
表征:
紫外-可见光谱:检测FITC特征吸收峰(约495 nm)及发射峰(约520 nm)。
荧光光谱:验证其荧光性能。
质谱或NMR:确认结构组成。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh
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