CY5-Transferrins,CY5标记转铁蛋白的合成步骤概述
产品名称:CY5-Transferrins,CY5标记转铁蛋白
纯度:95%+
CY5-Transferrins 是将花菁染料 CY5 共价偶联至转铁蛋白(Transferrin, Tf)分子上形成的荧光标记蛋白。转铁蛋白是一种铁结合糖蛋白,能够特异性结合铁离子并通过受体介导跨膜转运,是研究细胞铁摄取、药物递送及靶向载体的重要工具。CY5 标记赋予其近红外荧光特性,使蛋白在体内外实验中可实现实时追踪。
合成步骤概述如下:
活化染料:选择 CY5-NHS 酯或 CY5-羧基活化衍生物,溶解于适宜溶剂(如DMSO或PBS缓冲液),以保证活性基团可与蛋白氨基反应。
偶联反应:将转铁蛋白溶液(pH 7–8)缓慢加入染料溶液中,轻柔搅拌。赖氨酸侧链氨基或 N 端氨基作为亲核试剂攻击 CY5-NHS 酯,生成稳定的酰胺键,实现蛋白质荧光标记。反应温和,避免蛋白质变性,同时确保染料空间隔离,减少猝灭。
反应终止与缓冲交换:反应完成后,可通过加入甘氨酸或氨基酸缓冲液终止未反应的活性基团,并进行透析或超滤去除游离染料及小分子杂质,保证标记蛋白的纯度与功能完整性。
纯化与浓缩:采用透析、凝胶过滤或离心超滤方法去除游离染料和小分子杂质,并浓缩蛋白溶液至所需浓度。纯化后蛋白应保持水溶性和生物活性。
表征与质量控制:通过紫外-可见光谱(CY5吸收峰 ≈ 649 nm)、荧光光谱(发射峰 ≈ 670 nm)确认荧光特性;通过 SDS-PAGE 或质谱分析验证蛋白完整性及偶联效率。偶联染料分布应均匀,以保证标记稳定性和实验重复性。
CY5-Transferrins 可在细胞摄取、药物载体研究以及纳米载体表面功能化中发挥重要作用。偶联方法温和、可控,保证转铁蛋白结构及受体结合能力不受影响,同时赋予近红外荧光追踪能力,实现生物分子在体内外的动态监测和靶向研究。
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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