CY7.5-Sodium alginate,CY7.5标记海藻酸钠的反应条件
CY7.5-Sodium alginate 是通过将近红外荧光染料 Cyanine 7.5(CY7.5)与多糖海藻酸钠(Sodium alginate)分子链上的活性基团进行共价结合得到的荧光修饰多糖。海藻酸钠分子含有大量羧基官能团,而 CY7.5 染料常以 NHS 酯或氨基修饰的形式参与偶联反应,因此反应条件设计的关键在于如何高效地活化多糖羧基或提供合适的偶联基团,使染料能稳定接枝在多糖主链上。
在典型反应中,若使用 CY7.5-NH₂(带有伯胺基团的衍生物) 与海藻酸钠偶联,则通常需要先在温和条件下活化多糖分子上的羧基。常用的活化体系为 EDC/NHS(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺/ N-羟基琥珀酰亚胺),EDC 负责与羧基形成 O-酰脲活化中间体,随后 NHS 捕获该中间体生成更稳定的 NHS 酯活性基团,从而在 pH 6.0–6.5 的缓冲溶液中实现对海藻酸钠羧基的高效活化。此时加入 CY7.5-NH₂ 后,其伯胺基与活化的 NHS 酯发生酰胺键偶联,终形成稳定的 CY7.5-Alginate 共价衍生物。该过程通常在 水溶液或缓冲体系(如 MES 缓冲液,50 mM) 中进行,以保证多糖的溶解性与反应效率。
另一种常见方法是直接使用 CY7.5-NHS 酯 作为活性染料,其 NHS 酯结构可直接与海藻酸钠链上引入的氨基发生酰胺化反应。由于海藻酸钠仅含有羧基而缺少氨基,实验中通常需要先对海藻酸钠进行氨基化修饰(例如引入乙二胺或赖氨酸残基),然后在 pH 7.4–8.5 的 PBS 缓冲液 中反应,使 NHS 酯与多糖链氨基发生亲核取代反应。该反应通常在 室温或 4 °C 条件下避光进行 2–4 小时,以避免 CY7.5 荧光团光降解,同时确保高结合效率。
在反应条件的控制上,通常要求:
摩尔比控制:海藻酸钠的单糖单元与 CY7.5 衍生物的摩尔比常设定在 10:1 至 50:1,以避免过度修饰造成多糖溶解性和流变性能的改变。
溶液环境:CY7.5 对有机溶剂较敏感,因此体系多采用水相反应;必要时可加入少量 DMSO 或 DMF(<10%)帮助溶解染料。
温度与时间:通常在 20–25 °C 条件下反应,反应时间 2–12 小时,过长可能导致副反应增加。
纯化方式:反应结束后常采用透析(MWCO 10–50 kDa)或凝胶层析去除未反应的游离染料,得到纯净的 CY7.5-Sodium alginate。
综上,CY7.5-Sodium alginate 的合成反应条件核心是:在温和的水溶液中利用 EDC/NHS 活化羧基或利用 NHS 酯直接偶联氨基,反应过程中需要控制 pH、温度和摩尔比,以确保染料修饰效率与多糖结构的稳定性。
产品名称:CY7.5-Sodium alginate,CY7.5标记海藻酸钠
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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