CY7.5-Collagen,CY7.5标记胶原蛋白的反应原理
CY7.5-标记胶原蛋白(CY7.5-Collagen)是一类将近红外荧光染料CY7.5(Cyanine 7.5)与结构蛋白胶原蛋白通过共价反应偶联而成的荧光生物材料。胶原蛋白分子由三条多肽链缠绕形成三螺旋结构,分子中含有大量的赖氨酸和羟赖氨酸残基,提供了丰富的伯胺官能团位点,使其成为染料化学修饰的优良底物。在偶联反应中,常采用CY7.5的NHS酯活性形式,即CY7.5-NHS ester,通过与胶原蛋白赖氨酸残基的伯胺基团发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键,从而实现染料与蛋白分子的共价结合。
该反应原理基于经典的酯活化羧基化学:CY7.5染料结构中含有羧基,在通过NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化后形成活性酯,使其能够在温和条件下与氨基选择性反应。由于胶原蛋白分子表面分布着大量的氨基,染料分子能够与多个位点发生反应,从而实现多点标记,提高荧光强度。在反应过程中通常需要保持弱碱性条件(pH 7.5~8.5),以促进氨基脱质子化,提高亲核性,从而加速与NHS酯的偶联。
除了NHS酯化学外,还可利用CY7.5的叠氮或炔基修饰形式,通过“点击化学”(Cu(I)-催化的叠氮-炔环加成反应,CuAAC)与胶原蛋白预修饰的炔基或叠氮基团偶联。这种方法具有高选择性和高效率,且在温和条件下即可实现,对蛋白构象影响较小。另一种常见的方式是利用CY7.5的马来酰亚胺衍生物,特异性与胶原蛋白中巯基(半胱氨酸残基)发生Michael加成反应,形成稳定的硫醚键。这种方式尤其适合对胶原蛋白进行定点标记。
胶原蛋白的多级结构在标记反应中起到一定影响:其三螺旋和纤维结构在部分条件下可能限制染料的进入,因此反应时常需要在温和变性条件下进行,以暴露更多可反应位点。通过调节反应温度、染料/蛋白摩尔比和缓冲液离子强度,可以实现对标记程度的控制。
综上,CY7.5与胶原蛋白的化学反应原理主要基于活性酯-胺反应、点击化学反应和巯基-马来酰亚胺反应等经典偶联策略。这些方法不仅能保证荧光团的稳定结合,同时尽量保持胶原蛋白的构象与生物活性,从而制备出兼具结构功能与光学功能的荧光标记胶原蛋白,适用于生物成像、基质材料可视化和组织工程研究。
产品名称:CY7.5-Collagen,CY7.5标记胶原蛋白
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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