CY7.5-Keratin,CY7.5标记角蛋白的表征方面
CY7.5-标记角蛋白(CY7.5-Keratin)是将近红外荧光染料CY7.5通过共价键合修饰于角蛋白分子上形成的荧光标记生物材料。角蛋白作为一种富含半胱氨酸的纤维结构蛋白,具有大量二硫键和亲水性残基,是理想的生物高分子功能化底物。在合成完成后,标记产物通常为混合物,包含未反应的游离染料、部分降解蛋白片段以及不同标记度的角蛋白分子,因此必须经过系统的纯化与表征步骤,以获得具有均一结构和明确光学性质的样品。
纯化方面,常采用透析法去除未反应的小分子染料。CY7.5游离分子分子量小,透析膜选择分子量截断(MWCO)10~30 kDa,即可在连续透析数次后将游离染料清除,而角蛋白-染料大分子则被保留。另一种高效方法是凝胶过滤层析(SEC),利用大分子和小分子在多孔填料中的分离原理,将游离染料与CY7.5-角蛋白分开,获得高纯度产物。对于结构复杂的角蛋白溶液,还可采用超滤离心管进行快速分离,尤其适合大规模制备。
在表征方面,通常从以下几个角度进行:
光学表征:利用紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱对样品进行检测。CY7.5的吸收波长通常在780 nm左右,发射峰约在810 nm,通过吸收峰强度与角蛋白蛋白质峰(280 nm)的比值,可以计算标记度(即每个蛋白分子上结合的染料数量)。荧光光谱则用于确认染料结合后是否保持光学活性。
电泳分析:采用SDS-PAGE或变性PAGE分析产物条带,结合荧光成像可直接观察到标记蛋白的迁移条带,区别于未标记或游离染料。
质谱检测:对于较小的角蛋白片段,可使用MALDI-TOF质谱确认分子量变化,以验证染料的结合。
傅里叶变换红外光谱(FTIR)与圆二色谱(CD):用于分析蛋白在标记后是否保持的二级结构(α-螺旋、β-折叠)。
高效液相色谱(HPLC):可用于进一步定量分离和检测产物纯度,尤其是在需要获得均一标记程度的情况下。
通过上述纯化与表征步骤,能够确保CY7.5-角蛋白样品的高纯度和稳定性,并保证其在后续实验中的光学与生物学可靠性。纯化后的CY7.5-Keratin应用于细胞成像、组织标记、角质层研究及光学传感领域,尤其适合在近红外区域进行高穿透力成像,结合角蛋白在皮肤和毛发中的分布,为皮肤科学和材料科学研究提供强有力的工具。
产品名称:CY7.5-Keratin,CY7.5标记角蛋白
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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