CY7-PH响应性细胞穿膜,CY7标记PH响应性穿膜肽的反应步骤概述
CY7-pH响应性穿膜肽是一种通过化学偶联将近红外荧光染料Cyanine7(CY7)与pH响应性穿膜肽(Cell-Penetrating Peptide, CPP)构建的功能性分子。pH响应性穿膜肽在不同pH条件下可改变分子构象和表面电荷,实现对细胞膜的特异性渗透能力,而CY7赋予其近红外荧光特性(吸收约750 nm,发射约770–790 nm),便于体内外可视化追踪。
反应步骤概述:
肽设计与修饰:选用具有pH敏感性氨基酸序列(如组氨酸富集肽段)并保留关键细胞穿膜序列。根据偶联需求,可在肽N端或C端引入氨基或巯基,作为CY7活性衍生物的反应位点。
CY7活化:采用CY7-NHS酯或CY7-MAL对染料进行活化,形成可与肽功能基团反应的活性中间体。NHS酯可与肽末端氨基形成酰胺键;马来酰亚胺(MAL)可与肽巯基形成稳定硫醚键。
偶联反应:在温和缓冲体系(pH 7–8)中,将活化CY7与修饰肽混合。通过亲核取代或加成反应实现共价连接,生成CY7-pH响应性穿膜肽。反应温度通常控制在室温或4°C,以保护肽二级结构和pH响应功能。
保护与去保护:若肽序列中含有易反应功能基团,可采用Fmoc或Boc等保护策略,避免偶联过程中的副反应。偶联完成后,通过适当条件去除保护基团,恢复肽原有功能。
纯化与表征:使用高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤纯化偶联产物。质谱(ESI-MS)和核磁共振(NMR)确认偶联结构,UV-Vis及荧光光谱验证CY7荧光性能。
功能验证:通过体外细胞实验评估pH响应性渗透能力,在不同pH环境中观察荧光信号进入细胞的效率,以验证穿膜和pH响应特性。
该探针在酸性细胞微环境中构象改变后增强膜渗透性,实现靶向胞内递送,同时CY7的近红外信号可用于实时监测分子动力学、分布及细胞摄取,为药物递送和纳米载体研究提供可靠工具。
产品名称:CY7-PH响应性细胞穿膜
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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