CY7-Vimentin,CY7标记波形蛋白的反应机理
纯度:95%+
CY7-Vimentin是一种通过共价偶联将近红外荧光染料Cyanine7(CY7)与波形蛋白(Vimentin)结合的功能性蛋白标记分子。Vimentin是一种中间纤维蛋白,存在于间充质细胞中,分子量约57 kDa,具有多个赖氨酸和半胱氨酸位点,可用于化学偶联。CY7-Vimentin通过荧光标记实现体内外分布追踪、细胞骨架研究及功能分析。
反应机理
活性位点选择:CY7染料一般以NHS酯或马来酰亚胺(MAL)形式存在。NHS酯可与Vimentin赖氨酸的氨基形成稳定的酰胺键,而MAL可与蛋白巯基形成稳定的硫醚键,实现可控共价偶联。
偶联反应机制:在缓冲体系(pH 7–8)中,蛋白氨基或巯基作为亲核试剂攻击CY7活性酯或马来酰亚胺的电子缺乏碳原子,形成共价键。反应温和,可保留蛋白二级和三级结构。
保护与选择性:若蛋白含多个巯基,可通过保护策略选择性修饰特定位点,避免干扰结构域功能。NHS酯反应为随机赖氨酸修饰,偶联密度需控制,以维持蛋白生物活性。
反应条件优化:反应温度通常为4°C至室温,反应时间为2–12小时,轻柔搅拌避免蛋白聚集。
纯化与表征:偶联完成后,通过透析、凝胶过滤或SDS-PAGE分离未反应染料。通过UV-Vis和荧光光谱确认CY7标记,结合SDS-PAGE或质谱分析偶联效率及蛋白完整性。
CY7-Vimentin兼具蛋白功能和荧光示踪能力,可用于细胞骨架示踪、动态成像、蛋白相互作用分析以及药物递送体系中载体定位研究。通过控制偶联密度和位点,可在保留蛋白结构的同时实现高灵敏度近红外成像。
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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