CY7-Troponinl，CY7标记肌钙蛋白I的制备方法

CY7标记肌钙蛋白I（Troponin I, TnI）是通过将近红外荧光染料Cyanine7与TnI分子共价偶联形成的荧光复合物。TnI是肌钙蛋白复合物中的调节亚单位，主要通过抑制肌动蛋白与肌球蛋白的相互作用调控肌肉收缩。CY7-TnI的制备方法需兼顾染料偶联效率、蛋白构象稳定性及荧光活性，通常采用温和的缓冲体系和可控的化学修饰策略。

制备方法可分为几个关键步骤：

蛋白溶解与缓冲体系选择

将纯化的TnI溶解在生理缓冲液中（如PBS，pH 7.2–7.4），确保蛋白结构完整、活性保持。为了提高反应效率，可适量添加氨基酸缓冲剂或NaCl调节离子强度，同时避免使用高浓度还原剂，以防破坏蛋白构象。

选择适合的CY7衍生物

常用的CY7标记试剂包括CY7-NHS酯和CY7-马来酰亚胺酯。由于TnI表面富含赖氨酸残基，CY7-NHS酯可通过酰胺化反应与蛋白氨基偶联；若蛋白含有可暴露的半胱氨酸残基，则CY7-马来酰亚胺酯可选择性偶联形成稳定硫醚键。

偶联反应条件

在避光条件下，将CY7染料缓慢加入TnI溶液中，保持适宜的摩尔比（通常CY7与TnI为3–10:1），在室温或4℃缓慢搅拌4–12小时。pH需维持在中性或微碱性，以保证NHS酯或马来酰亚胺酯的活性，同时防止蛋白质构象改变。

反应终止与纯化

反应结束后，使用透析（分子量截留约3.5 kDa）或凝胶过滤去除未偶联的游离CY7分子。可通过UV-Vis和荧光光谱监测标记效率，同时评估蛋白结构的完整性。标记后的CY7-TnI可冻干储存，或在低温缓冲液中保存，以维持荧光活性和蛋白功能。

功能和应用验证

制备的CY7-TnI通常需进行功能验证，如保持对肌动蛋白-肌球蛋白复合体的调节能力，并通过荧光成像确认标记分布均匀、信号强度稳定。

通过上述方法获得的CY7-TnI兼具荧光可视化功能和蛋白活性，可用于细胞水平或体外体系中对肌钙蛋白I分子的动态追踪和相互作用研究。

产品名称：CY7-Troponinl，CY7标记肌钙蛋白I

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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