产品名称：Phalloidin-AF488，AF488 标记鬼笔环肽

Phalloidin-AF488（AF488 标记鬼笔环肽）是生物医学研究中用于细胞骨架肌动蛋白（F - 肌动蛋白）特异性标记的核心荧光探针，其独特价值在于将鬼笔环肽对 F - 肌动蛋白的高度亲和力与 AF488 绿色荧光染料的优异光学性能相结合，为肌动蛋白的定位、形态观察及动态追踪提供了高特异性、高灵敏度的研究工具。从分子组成来看，该探针由两大关键功能模块构成：一是鬼笔环肽（Phalloidin），一种从剧毒蘑菇鬼笔鹅膏（Amanita phalloides）中提取的环状七肽，分子质量约 788Da，其核心生物活性是与细胞内的丝状肌动蛋白（F - 肌动蛋白，即肌动蛋白聚合形成的纤维结构）发生特异性、高亲和力结合，而对单体肌动蛋白（G - 肌动蛋白）几乎无结合能力 —— 这种结合具有不可逆性，解离常数（Kd）低至 10-7mol/L，且结合后能稳定 F - 肌动蛋白的结构，抑制其解聚，确保在实验过程中肌动蛋白纤维的形态不发生改变，为准确观察肌动蛋白的分布提供保障；同时，鬼笔环肽的小分子结构（直径约 1nm）使其能轻松穿透固定和透化后的细胞或组织样本，深入细胞内部与 F - 肌动蛋白结合，避免了大分子探针（如抗体）难以穿透样本的局限。二是 AF488 荧光染料，作为 Alexa Fluor 系列中的绿色荧光代表，它具备卓越的光学参数：激发波长约 495nm，发射波长约 519nm，荧光量子产率高达 0.92，光稳定性远优于传统的荧光素（FITC），能有效抵抗长时间激发光照射导致的光漂白，确保在长时间成像实验（如活细胞动态观察）中荧光信号的持续稳定；此外，其荧光光谱峰形尖锐，与其他颜色荧光染料（如红色 AF594 标记的微管蛋白探针、蓝色 DAPI 标记的细胞核探针）的光谱重叠度低，可满足多色荧光共定位实验需求，实现对细胞骨架多组分的同步观测。

在制备工艺上，Phalloidin-AF488 的偶联生产需攻克小分子肽与荧光染料的高效、特异性连接难题，同时确保鬼笔环肽的生物活性不受影响。由于鬼笔环肽本身不含易于修饰的氨基、巯基等基团，需先对其进行化学改造：通过固相肽合成技术或化学衍生化方法，在鬼笔环肽的特定氨基酸残基（如赖氨酸残基，若天然序列中不含则通过突变引入）上引入可反应的活性基团，常用的为氨基或巯基。随后采用特异性偶联策略实现与 AF488 的连接：若鬼笔环肽修饰有氨基，则利用 AF488-NHS 酯（AF488 的活性酯衍生物）与之发生酰胺化反应，形成稳定的酰胺键；若修饰有巯基，则采用 AF488 - 马来酰亚胺（AF488 的马来酰亚胺衍生物）与之发生硫醚键反应，这种反应具有高度特异性，仅与巯基反应，避免对鬼笔环肽其他基团的干扰。制备过程中，关键控制点有两个：一是活性基团的引入位点，必须选择不影响鬼笔环肽与 F - 肌动蛋白结合位点的区域，通过分子模拟和活性检测筛选最佳修饰位点，确保偶联后鬼笔环肽的结合活性保留率 > 90%；二是染料与鬼笔环肽的摩尔比例（D/P 比），由于鬼笔环肽为小分子，每个分子仅能偶联 1 个 AF488 染料分子（D/P 比 = 1:1），因此需严格控制反应条件（如温度、pH、反应时间），确保偶联效率 > 80%，减少未偶联的游离鬼笔环肽和染料。偶联反应完成后，需通过高效液相色谱（HPLC）进行纯化，利用反相色谱柱（如 C18 柱）分离 Phalloidin-AF488 与游离 AF488、未修饰鬼笔环肽等杂质，通过紫外 - 可见分光光度法和质谱法验证产物纯度（要求纯度 > 98%）和分子结构，确保最终探针无杂质干扰，且能特异性结合 F - 肌动蛋白。

在应用场景方面，Phalloidin-AF488 凭借其对 F - 肌动蛋白的特异性标记能力和绿色荧光的高辨识度，在细胞骨架研究、细胞生物学行为分析、病理学诊断及药物筛选等领域发挥着不可替代的作用。在细胞骨架研究中，它是观察 F - 肌动蛋白分布与形态的 “金标准” 工具：通过荧光显微镜或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM），可清晰显示细胞内 F - 肌动蛋白的精细结构，如上皮细胞的应力纤维、成纤维细胞的片状伪足与丝状伪足、神经元的轴突与树突棘、白细胞的片状伪足等；同时，结合多色荧光共定位技术，可与微管蛋白探针（如 AF594 标记的抗微管蛋白抗体）、中间纤维探针（如 Cy5 标记的抗波形蛋白抗体）联用，分析三种细胞骨架成分的空间分布关系，揭示细胞骨架在维持细胞形态、细胞器定位中的协同作用。在细胞生物学行为分析中，Phalloidin-AF488 可用于研究细胞迁移、细胞分裂、细胞凋亡等过程中 F - 肌动蛋白的动态变化：在细胞迁移研究中，通过实时成像可观察到 F - 肌动蛋白在细胞前沿（伪足）的快速聚合与后端（尾足）的解聚，揭示细胞迁移的 “前端推进 - 后端收缩” 机制；在细胞分裂研究中，可清晰显示分裂期细胞的收缩环（由 F - 肌动蛋白和肌球蛋白组成）形成与收缩过程，分析细胞分裂的调控机制；在细胞凋亡研究中，可观察到凋亡细胞内 F - 肌动蛋白的解聚与重排，如细胞皱缩时应力纤维的断裂、凋亡小体形成时 F - 肌动蛋白的包裹作用，为细胞凋亡的形态学判断提供依据。在病理学诊断中，Phalloidin-AF488 可用于肿瘤细胞、病变细胞的细胞骨架异常分析：肿瘤细胞的 F - 肌动蛋白分布常发生显著改变，如应力纤维减少、丝状伪足增多，这些变化与肿瘤细胞的侵袭性、迁移能力密切相关，通过 Phalloidin-AF488 标记可直观观察到这些异常，辅助肿瘤的病理分型与预后评估；此外，在神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）研究中，可利用该探针观察神经元内 F - 肌动蛋白的损伤情况，分析疾病进展与细胞骨架破坏的关联。在药物筛选领域，Phalloidin-AF488 可用于评估药物对细胞骨架的影响：许多药物（如抗肿 药物紫杉醇、细胞松弛素 D）通过作用于细胞骨架发挥药效，紫杉醇可稳定微管，细胞松弛素 D 可抑制 F - 肌动蛋白聚合，通过 Phalloidin-AF488 标记观察 F - 肌动蛋白的形态变化，可快速筛选出能调控细胞骨架的候选药物；同时，在药物毒性评估中，可通过观察 F - 肌动蛋白的异常解聚或聚合，早期判断药物对细胞的毒性作用，如某些药物可能导致 F - 肌动蛋白大量聚集，影响细胞正常功能，这些变化可通过荧光信号清晰识别。

产地：西安

规格：50mg 100mg 500mg

纯度：95%

状态：固体/粉末

储藏条件：冷藏

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发，生产，销售为一体的高科技企业，可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等，可以满足不同客户的定制需求。

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小编：HLL 2025年9月4日