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AF532 TSA,Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂
发布时间:2025-09-03     作者:HLL   分享到:

产品名称:AF532 TSA,Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂

Alexa Fluor532 酪胺信号放大试剂(AF532 TSA)是一种基于酶催化反应的高灵敏度荧光检测工具,在生物医学研究的低丰度生物分子检测领域(如免疫组织化学、原位杂交、流式细胞术等)具有不可替代的作用,其核心优势在于能够通过酪胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)技术,将微弱的生物分子信号进行指数级放大,从而实现对低表达或微量存在的目标分子的精准检测。


从技术原理与分子构成来看,AF532 TSA 试剂主要由两部分组成:Alexa Fluor532 荧光染料标记的酪胺分子(即荧光酪胺)以及配套的过氧化物酶(通常为辣根过氧化物酶 HRP,需单独提供或与特异性结合试剂偶联)。其信号放大过程基于辣根过氧化物酶催化的酪胺氧化聚合反应,具体机制如下:首先,通过特异性结合反应(如免疫反应、核酸杂交),将辣根过氧化物酶(HRP)定位到目标生物分子上。例如,在免疫检测中,HRP 可通过与目标抗原特异性结合的抗体偶联(即 HRP 标记抗体),形成 “目标抗原 - HRP 标记抗体” 复合物;在原位杂交中,HRP 可偶联到核酸探针上,通过探针与靶核酸的杂交结合实现定位。随后,向反应体系中加入 AF532 TSA 试剂(荧光酪胺)与过氧化物酶底物(如过氧化氢 H₂O₂)。在 HRP 的催化作用下,H₂O₂ 被分解产生活性氧物种,同时 HRP 被激活,激活后的 HRP 能够催化荧光酪胺分子发生氧化反应,生成高活性的酪胺自由基。这些酪胺自由基具有极强的反应活性,能够迅速与附近(通常在 HRP 酶分子周围几百纳米范围内)生物分子(主要是蛋白质)上的富电子基团(如酪氨酸残基的酚羟基、组氨酸残基的咪唑基等)发生共价结合,实现荧光酪胺分子在目标生物分子附近的原位沉积。由于每个 HRP 酶分子在催化反应期间能够持续催化大量酪胺分子氧化并沉积,因此会在目标生物分子周围形成大量 Alexa Fluor532 荧光染料的聚集,从而将原本微弱的目标分子信号(对应单个或少量 HRP 分子)放大为强烈的荧光信号,显著提高检测的灵敏度,使低丰度目标分子的检测成为可能。


在性能特点方面,AF532 TSA 试剂展现出多项显著优势,使其在低丰度生物分子检测中脱颖而出。首先是极高的信号放大效率,传统的荧光标记方法(如直接荧光标记抗体、荧光标记探针)通常是 “一对一” 或 “一对几” 的标记模式,即一个目标分子仅能结合少量荧光染料分子,信号强度有限,难以检测到低丰度目标。而 AF532 TSA 技术通过酶催化的级联反应,每个 HRP 酶分子可催化数十至数百个荧光酪胺分子沉积,实现信号的指数级放大,放大倍数通常可达 10-100 倍甚至更高,能够将原本低于检测限的微弱信号提升至可被清晰检测的水平,有效解决了低丰度生物分子(如稀有序列的核酸、低表达的蛋白质受体、微量的细胞因子)检测困难的问题。


其次是良好的空间分辨率与信号特异性,AF532 TSA 技术的信号放大过程具有严格的原位性,酪胺自由基的反应活性极高但寿命较短,仅能在 HRP 酶分子周围极短的距离内(约 200-500 nm)与生物分子发生结合,不会扩散到较远的区域,因此荧光信号能够精准地定位在目标生物分子所在的位置,不会产生明显的扩散性背景,保证了检测的空间分辨率。这种原位放大特性使其特别适用于组织切片或细胞样本中目标分子的定位检测,能够清晰显示目标分子在细胞内的亚细胞定位(如细胞膜、细胞质、细胞核内的特定区域)或在组织中的分布特征(如特定细胞类型、组织层中的表达),为研究目标分子的功能与生理病理意义提供精准的空间信息。同时,由于信号放大依赖于 HRP 的特异性定位(通过免疫反应或核酸杂交实现),只有在目标分子存在的区域才会发生 HRP 催化的荧光沉积,非目标区域几乎无信号产生,因此具有良好的信号特异性,背景荧光较低,信噪比高,有效减少了非特异性信号的干扰,提高了检测结果的准确性。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

AF532 TSA

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小编:HLL 2025年9月4日

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