CY7-Desthiobiotin,CY7标记脱硫生物素的光谱分析
CY7标记脱硫生物素(CY7-Desthiobiotin)是一种将近红外荧光染料CY7通过共价偶联修饰在脱硫生物素(Desthiobiotin)分子上的功能性复合物。脱硫生物素是一种结构类似于生物素的分子,但缺少噻唑环中的硫原子,因此与亲和素(Avidin/Streptavidin)结合力比生物素弱,可实现可逆结合特性。CY7是一种近红外荧光染料,具有750–800 nm的发射峰、高摩尔消光系数和优良的光稳定性。通过CY7标记,Desthiobiotin不仅保留了其特有的可逆结合特性,还获得了荧光可视化能力,为分子示踪、化学分析及生物成像提供工具。
CY7-Desthiobiotin的纯化通常在偶联反应完成后进行。偶联反应多采用CY7-NHS酯与Desthiobiotin分子上的氨基或羟基进行反应,生成稳定的共价键(酰胺键或酯键)。反应完成后,体系中可能含有未反应的CY7染料、游离Desthiobiotin以及副产物。为了获得高纯度的CY7-Desthiobiotin,需要采用多步分离和纯化技术:
柱层析纯化
硅胶柱或C18反相高效液相色谱(HPLC)是主要纯化。HPLC分离通过梯度洗脱实现,利用CY7标记后的复合物疏水性增强的特性,将CY7-Desthiobiotin与游离染料和未反应的生物素分离。通过监测近红外吸收(约750 nm)可实时检测目标产物,收集对应峰段以获得纯化产物。
透析或超滤
对于水溶性CY7-Desthiobiotin,可采用透析或超滤方法去除低分子量杂质,如未反应的CY7-NHS酯和小分子副产物。透析膜孔径选择适合CY7-Desthiobiotin分子量,以保证产物不流失,同时实现杂质去除。
纯化条件优化
纯化过程中需注意光保护,避免CY7染料因光照而发生荧光猝灭或降解。整个过程常在避光条件下进行,操作温度保持在室温或低温(4°C)以防止产物降解。同时,溶液pH调控在中性至弱碱性,以保持酰胺键稳定性和染料荧光性能。
在表征方面,CY7-Desthiobiotin的化学结构和纯度通过多种分析进行确认:
光谱分析
紫外-可见光谱(UV-Vis)显示CY7特征吸收峰(约750 nm)及Desthiobiotin的官能团特征吸收。荧光光谱显示CY7标记后的近红外发射峰,峰位和强度可反映偶联效率。
质谱分析
通过质谱(MS)可确认分子量是否符合CY7-Desthiobiotin的预期,并检测是否存在多标记或副产物。
色谱分析
高效液相色谱(HPLC)可用于定量纯度评估,通过峰面积比计算偶联产物占总量比例,确保产物达到高纯度标准。
功能性验证
偶联后的CY7-Desthiobiotin仍保持与亲和素的可逆结合能力,可通过亲和实验(如亲和柱吸附与洗脱)验证其生物学功能是否保留。这也是表征的重要指标之一,确保荧光标记不会破坏Desthiobiotin的核心特性。
总之,CY7标记脱硫生物素通过合理的偶联反应、严格的纯化步骤及多表征,能够获得高纯度、稳定且功能完整的荧光复合物。该产物兼具CY7的近红外可视化能力和Desthiobiotin的可逆亲和特性,可应用于分子示踪、蛋白质相互作用研究、荧光检测以及可控药物递送系统中。
产品名称:CY7-Desthiobiotin,CY7标记脱硫生物素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09