CY7-Wheat germ agglutinin,CY7标记小麦胚芽凝集素的化学特性
CY7标记小麦胚芽凝集素(CY7-Wheat Germ Agglutinin, CY7-WGA)是一种将近红外荧光染料CY7共价偶联于小麦胚芽凝集素蛋白分子上的复合物。WGA属于凝集素家族,是一种小分子量(约36 kDa)二聚体蛋白,富含氨基糖结合结构域,能够特异性识别并结合含N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)或唾液酸残基的多糖结构。通过CY7标记,WGA获得近红外荧光特性,适合用于细胞膜糖链示踪、分子定位及药物递送系统研究,同时保持其的糖结合能力和生物相容性。
化学特性
蛋白质结构与功能基团
WGA由两条相同的多肽链组成,含有多个赖氨酸和半胱氨酸残基,为CY7偶联提供理想位点。赖氨酸的自由氨基可与CY7-NHS酯反应形成稳定的酰胺键,半胱氨酸残基可与CY7-Maleimide形成稳定的硫醚键。偶联位点设计通常避开糖结合位点及二聚体界面,以确保荧光标记后蛋白仍能维持特异性识别功能。
CY7染料化学结构特性
CY7为典型的Cyanine染料,分子骨架由两个芳香杂环通过亚甲基链相连,形成共轭电子体系,赋予其强烈的近红外吸收(约750 nm)及发射(约770–780 nm)特性。其末端含有活性基团(如NHS酯或马来酰亚胺),能够与蛋白质的氨基或巯基共价结合,形成稳定的标记复合物。CY7的高度共轭结构使其在标记WGA后保持优异的荧光量子产率和光稳定性。
偶联反应化学特性
CY7-WGA的偶联主要通过亲核取代或Michael加成反应完成:
NHS酯反应:CY7-NHS酯在中性至弱碱性缓冲液(pH 7.4–8.5)中与WGA赖氨酸氨基反应,形成酰胺键。该反应快速且条件温和,不会破坏蛋白折叠结构。
马来酰亚胺反应:CY7-Maleimide与WGA表面半胱氨酸巯基形成硫醚键,特异性高且稳定性好。该方式可实现位点选择性标记,避免过度修饰。
溶解性与稳定性
未标记WGA可溶于水和缓冲液,溶液呈中性或弱碱性时稳定。CY7偶联后,由于染料分子引入一定疏水性,可能影响蛋白质溶解性,但通过调节缓冲盐浓度、pH值和添加低浓度非离子表面活性剂,可保持复合物的均一分散状态。偶联后复合物在低温避光条件下可长期稳定保存,且在体外实验中荧光性能保持良好。
光学化学特性
CY7-WGA在紫外-可见光谱中显示蛋白质280 nm吸收峰和CY7染料的近红外吸收峰(约750 nm),荧光发射峰约770–780 nm。光学性质稳定,适合深部组织成像和多通道荧光检测。荧光强度与标记密度相关,标记密度可通过CY7与WGA的摩尔比控制,以平衡荧光信号强度和蛋白功能保持。
多功能化学特性
CY7-WGA表面可进一步修饰,如PEG化或偶联靶向配体,实现生物相容性增强和靶向递送功能。双功能设计不仅提供近红外荧光信号,还允许构建药物递送系统或分子示踪平台。
表征方法
复合物可通过紫外-可见光谱及荧光光谱验证标记效率和荧光性能,质谱分析确认偶联位点和标记度,SDS-PAGE结合荧光扫描或HPLC进一步评估产物纯度和均一性。功能性检测包括糖结合能力验证,确保标记后WGA仍能与目标糖链特异性结合。
总结
CY7-Wheat Germ Agglutinin是一种结构稳定、荧光性能优异的糖结合蛋白复合物。其化学特性表现为多功能偶联位点、高光稳定性、可调荧光强度及可进一步功能化的潜力。
产品名称:CY7-Wheat germ agglutinin,CY7标记小麦胚芽凝集素
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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