CY7-Calsequestrin,CY7钙网蛋白的光学特性与标记意义
CY7-钙网蛋白(CY7-Calsequestrin, CY7-CSQ)是一类通过将近红外荧光染料Cyanine7(CY7)与钙网蛋白(Calsequestrin, CSQ)偶联而得到的荧光标记复合物。该复合物兼具钙网蛋白的高钙离子结合能力与CY7的近红外成像特性,在钙信号研究、肌肉钙库动态监测、钙相关蛋白质互作分析以及钙稳态研究中具有独特的应用价值。
1. 钙网蛋白的结构与功能基础
钙网蛋白是一种高容量低亲和力的钙结合蛋白,主要分布于肌肉细胞的肌质网(sarcoplasmic reticulum, SR)内。其分子量约45 kDa,整体构象富含酸性氨基酸残基,能通过羧基侧链与Ca²⁺结合,单分子可同时结合40–50个Ca²⁺离子。CSQ不仅作为钙储存分子,还通过与肌质网膜上的雷诺定受体(RyR)、三联蛋白(Triadin)和结节蛋白(Junctin)相互作用,参与钙释放通道的调控,从而在肌肉收缩与舒张过程中发挥核心作用。
2. CY7染料的光学特性与标记意义
CY7是一种典型的近红外花菁染料,吸收峰在750–770 nm之间,发射峰位于780–800 nm,具有高光学灵敏度和较强的组织穿透能力。近红外区的低背景自发荧光与弱光散射特性,使其成为体内外荧光成像的理想工具。通过将CY7与CSQ偶联,可以在保持蛋白钙结合功能的基础上赋予其实时可视化能力,从而实现对钙库动态及蛋白定位的研究。
3. CY7-CSQ的构建与标记策略
CY7与CSQ的偶联常通过CY7-NHS酯与蛋白赖氨酸残基的氨基反应实现,形成稳定的酰胺键。为避免对蛋白活性位点的干扰,通常控制修饰度在1–3个染料分子/蛋白,以兼顾荧光信号强度与功能保持。标记完成后,CSQ仍能维持其钙结合能力与蛋白互作特性,染料则提供光学信号用于成像和检测。
4. CY7-CSQ的生物应用
钙库成像与动态监测:
CY7-CSQ能够作为肌质网钙储存的可视化探针。利用CY7的近红外荧光特性,可在活细胞或组织水平监测钙离子储存与释放的空间分布与动态变化。这为研究肌肉兴奋-收缩耦联中的钙信号传导提供了直观手段。
蛋白互作与钙信号通路研究:
CSQ与RyR、Triadin和Junctin等蛋白的相互作用对于钙通道的稳定与调控至关重要。通过CY7标记,研究者可结合荧光成像、免疫印迹或微阵列芯片技术,追踪CSQ在细胞中的定位和与伴侣蛋白的互作过程,从而揭示钙信号调控的分子机制。
近红外活体成像:
由于CY7发射光在近红外区具有较强组织穿透性,CY7-CSQ可用于动物模型中的活体成像。其应用不仅局限于细胞内钙库定位,还可以扩展到心脏或骨骼肌组织的钙稳态动态监测,为活体水平的生理过程研究提供工具。
纳米载体或生物材料功能化:
CY7-CSQ还可与纳米颗粒或水凝胶结合,用于钙离子响应型材料的构建。例如,将其固定在Ca²⁺响应的纳米平台上,可作为双功能模块:CSQ负责结合和缓冲钙离子,CY7则提供荧光信号,实现“感知-成像”一体化设计。
荧光标记与定量检测:
CY7-CSQ可在生化实验中用作特异性钙结合蛋白标记物,帮助检测钙库容量、Ca²⁺释放效率或相关信号分子水平。在蛋白质芯片或生物传感平台中,也可利用其荧光信号进行定量分析。
5. 应用优势
与传统小分子钙探针(如Fura-2、Fluo-4等)相比,CY7-CSQ的优势在于:
特异性高:依赖蛋白本身的钙结合位点,避免非特异结合。
信号稳定:CY7荧光抗光漂白性较强,可实现长期追踪。
组织穿透性强:适合体内深层成像。
功能整合:兼具蛋白调控作用与光学探针功能,可用于机制研究。
产品名称:CY7-Calsequestrin,CY7钙网蛋白
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
关于我们
齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。
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