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FITC-MPG,荧光素标记穿膜肽MPG的合成路线
发布时间:2025-09-09     作者:axc   分享到:

FITC-MPG,荧光素标记穿膜肽MPG的合成路线

FITC-MPG是一种将异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)共价偶联至MPG(Membrane Penetrating Peptide, 穿膜肽)的小分子荧光衍生物。MPG肽通常由18个氨基酸组成,其序列(如 GALFLGFLGAAGSTMGAWSQ)结合了HIV-1衍生序列与抗原肽序列特征,具备高效穿膜能力,可帮助药物或核酸分子跨越细胞膜。通过FITC标记,MPG获得绿色荧光信号(激发约495 nm,发射约520 nm),便于追踪其在细胞膜穿透、胞内分布及药物输送过程中的行为,应用于药物递送、分子示踪及细胞成像研究。

FITC-MPG的合成路线主要包括MPG肽的固相合成和荧光标记两个关键步骤:

MPG肽的固相合成(SPPS):

MPG肽通常采用Fmoc(9-芴甲氧羰基)固相合成策略,通过树脂为载体逐步延伸肽链。具体过程如下:

树脂活化并接枝个氨基酸(C端氨基酸),保护C端与固相基团共价连接。

逐步脱保护和氨基酸偶联,每步采用Fmoc保护的氨基酸与活化剂(如HBTU、HATU)进行缩合,确保序列正确性和高收率。

完成肽链延伸后,通过酸性条件(如TFA)从树脂上切割肽链,并去除侧链保护基团,得到全反式MPG肽。

荧光标记(FITC偶联):

MPG肽合成完成后,通常在肽N端或赖氨酸侧链保留自由氨基,为FITC偶联提供反应位点。偶联反应步骤如下:

将干燥MPG肽溶解于弱碱性缓冲液(如碳酸盐缓冲液,pH 8.0–9.0),确保氨基未质子化以保持亲核活性。

FITC溶于少量DMSO中,缓慢加入多肽溶液中,FITC的异硫氰酸基团(–N=C=S)与肽氨基发生亲核加成,形成稳定硫脲键(–NH–C(=S)–NH–),完成荧光标记。

反应通常在室温或低温(4–25℃)下避光进行2–12小时,以避免荧光团降解并确保标记效率。

纯化与表征:

反应结束后,可加入甘氨酸或氨水终止过量FITC的反应。

使用高效液相色谱(HPLC)纯化FITC-MPG,去除未反应的FITC及副产物。

纯化产物通过质谱(MS)、HPLC或紫外-可见光光谱分析,确认分子量、标记程度和荧光特性,确保纯度与功能性。

FITC-MPG的合成路线设计注重保持MPG肽的穿膜活性及结构完整性,同时保证荧光标记稳定、可检测。通过合理选择偶联位点(N端或赖氨酸侧链)、控制FITC与肽摩尔比和反应条件,可实现高效标记而不影响肽的生物功能。

终得到的FITC-MPG分子,兼具穿膜肽的胞内递送能力和荧光示踪功能,可用于细胞摄取研究、纳米载体输送示踪、蛋白质/核酸传递效率评估及高通量药物筛选实验。其化学结构稳定,水溶性良好,荧光强度可调,提供了理想的功能化分子工具。

产品名称:FITC-MPG,荧光素标记穿膜肽MPG

纯度:95%+

性状:固体或液体

储藏条件:-20°C干燥避光保存

包装规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需提供)

厂家:齐岳生物.

FITC-MPG

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务,如活性酯(NHS酯)、马来酰亚胺(MAL)、叠氮(N₃)、炔基(alkyne)等,便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合,实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外,齐岳生物还提供定制染料标记服务,包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物,满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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